- ￥510
- Biorigin
- 北京
- BN27183-1000T
- 2025年12月14日
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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
BSA附件-20℃，其它试剂2-6 ℃
- 保质期：
一年有效
- 英文名：
Bradford Protein Assay Kit
- 库存：
999
- 供应商：
Biorigin
- 规格：
1000T
产品信息：
本试剂盒有效期为一年
产品简介:
Bradford 蛋白浓度测定法是目前常用的灵敏度较高的蛋白浓度测定方法之一，其实验原理是根据考马斯亮蓝(Coommassie Brilliant Blue)G-250与蛋白质的碱性和芳香族氨基酸特别是精氨酸（Arginine） 在酸性介质中结合后，溶液转变为蓝色，使染料的最大吸收峰从 465nm 迁移到 595nm，且测定的吸光 值与蛋白浓度成正相关关系；即可通过测定蛋白在 595nm 处的吸光度，推算蛋白浓度，进而进行定量测定。
本法通过吸光值，推算蛋白浓度，实现了蛋白浓度测定的快速性和简便性。灵敏度高，比 Lowry 法大约高四倍，测定速度快、简单，仅需一种试剂即可，且不受大多数样品中化学试剂的影响。
注意事项：
1. Bradford 染色液使用前，需将其恢复至室温，有利于提高检测的灵敏度；并在使用前充分混匀
2. 标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用 Beer 定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度；为了得到更精确的结果，每个蛋白梯度和样品均需做复孔，每次试验都必须建立标准曲线
3. Bradford 法测定蛋白浓度对大多数化学物质的兼容性比较好，比如对还原剂 DTT 的兼容性高达 5mM；但会受到略高浓度的去垢剂影响，需确保 SDS 低于 0.01%，Triton X-100 低于 0.05%，Tween 20/ 60/80 低于 0.015%等
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
使用说明：
一．配制 BSA 标准品体系（线性范围 100-1500ug/ml）：
可参考下表配制不同浓度的标准品梯度 ，并充分混匀，避免气泡生成：
标准品稀释液原则上应与为蛋白样品的溶解液一致，但也可用蒸馏水、生理盐水或 PBS 进行稀释
二. 蛋白浓度测定：
（1）分别取 5µl 不同浓度蛋白标准品和待测样品加入 96 孔板中；若样品不足，可以用稀释液进行稀释，但须记录样品稀释比例
（2）各孔加入 200µl G250 染色液，充分振荡混匀，室温孵育 2-3min
（3）用酶标仪测定 595nm 处的吸光度
（4）以标准蛋白浓度（ug/ml）为横坐标，用 OD 值为纵坐标绘制标准曲线，根据测出的待测样品的 A595 值，即可得出样品的蛋白质浓度，进而进行定量计算
参考标准曲线：
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文献和实验5. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。 6. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。 http://beyotime.com/bradford.htm 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
Bradford Protein Assay - a microassay for determining protein content in a 96-well microtiter plate format Laboratory of P.J.Hansen,Dept.of Animal Sciences,University of Florida Introduction
Considerations for useThe Bradford assay is very fast and uses about the same amount of protein as the Lowry assay.It is fairly accurate and samples that are out of range can be retested within minutes.The Bradford is recommended for general use
