- ￥80
- Biorigin
- BN20105-5ml
- 2026年05月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
有效期1年
- 英文名：
SDS-PAGE loading buffer,6X(with DTT)
- 库存：
999
- 供应商：
Biorigin
- 规格：
5ml
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文献和实验或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
电解质移动形成。20 世纪 90 年代开始出现的商品化的 IPG 胶条用于等电聚焦电泳，大大提高了电泳的重复性，因而被广泛使用。 然而，使 用 IPG 胶条进行等电聚焦时，需要施加很高的电压，而 UKS 溶液中的高含盐量和 SDS 使得该缓冲液不适合这种等电聚焦系统 [6]，因而必须采用新的样品缓冲液。 本章，我们将着重描述分别为进行传统的等电聚焦和现代的 IPG 等电聚焦电泳制备样品所采用的不同步骤。2. 材料 2.1 蛋白沉淀溶液 含 10% (m/V） 三氯
上导线连接。蛋白带型条状（streak）上样过量。 样品中盐浓度过高。降低蛋白上样量。通过透析或凝胶过滤降低样品中的盐浓度。样品沉淀。加大样品中SDS的浓度。样品中的污染，如脂类或DNA 复合物。离心或过滤样品以除去特定污染。制胶不佳。确保灌胶均匀，一次完成。条带模糊。蛋白样品部分变性。完全变性蛋白。蛋白样品部分还原。确保加入足够量的DTT或β巯基乙醇。电泳时间过长。观察前面的指示剂染料，掌握恰当的电泳时间。哑铃形条带或"微笑"条带。上样体积过大导致不完全堆积。使用恰当的上样体积。如果样品过稀
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