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- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
有效期2年
- 英文名:
ColorMixed Protein Marker(11-180KD)
- 库存:
999
- 供应商:
Biorigin
- 规格:
250μl,50T
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文献和实验【求助】180KD的膜蛋白western转膜条件怎样?(湿转)
zhywang4072 鄙人现在做一180KD的蛋白,之前转PVDF膜用的是100v两个半小时,预染marker转得很漂亮,内参也很不错,但是目标蛋白条带却没有,请教各位大侠,这是什么原因?还有诸位大蛋白转膜时候条件怎样?我用的是湿转,谢谢 wodezxn 我觉得100V2h肯定是足够了,没转上应该是你目的蛋白的问题,可能是蛋白表达量太少或者你提蛋白的时间有问题。 zhibinx2007
个人工作多年以后再回来读博的,所以实验技术什么的从头学起,这其中WB走的弯路最多,现在就和大家聊聊我个人的历程,并交流一下自己的经验。这个经验是我跑一个11KD分子量分泌性蛋白得出的,肯定不会适用于所有情况,但是论坛里面受困于小分子量蛋白WB的朋友还是很多,所以聊胜于无,在此分享一下。我搞得蛋白质是一个11KD的分泌性蛋白,并且是我实验设计中一个重要的指标,最初学习WB技术,受困于二抗不合格一直连内参都做不出来。。。后面改换抗体之后,才相对顺利一点,其他指标也相继出来了。所以抗体真的很重
蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色好,上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物,通过与染料共价耦联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验,这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后,以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如,已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处。如果使用预染Marker






