考马斯亮蓝凝胶染色试剂盒（染色液+脱色液）

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）（图）

g ，加1mol/L HCl 48ml，加重蒸水80ml使其溶解，调pH6.7，定容至100ml， 4℃保存。5. TEMED（四乙基乙二胺）原液6.10%过硫酸铵（用重蒸水新鲜配制）7. pH8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液：称取Tris6.0g，甘氨酸28.8g，加蒸馏水约900ml，调pH8.3后，用蒸馏水定容至1000ml。置4℃保存，临用前稀释10倍。8. 考马斯亮蓝G250染色液：称100mg考马斯亮蓝G250，溶于200ml蒸馏水中，慢慢加入7.5ml 70%的过氯酸，最后补足水

种子蛋白质系统分析：（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）

ml，溴酚蓝0.5g，SDS l0g，溶于水，用HCI调PH至8.0，定容至500ml。( 11)脱色液 甲醇：乙酸：水＝5：1 ：5（体积比）( 12)染色液（0.25%考马斯亮蓝R250）1.00g考马斯亮蓝R250，用脱色液400ml溶解，过滤备用。( 13)低分子质量标准蛋白溶液，包括溶菌酶（MW=14400Da）大豆胰蛋白酶抑制剂（215000）、碳酸酐酶（310000）、卵白蛋白（450000）、牛血清白蛋白 (662000）、磷酸化酶B (925000）。用样品缓冲液配成2mg/ml

凝胶蛋白检测技术

(脱色液I加入0．25％考马斯亮蓝R―250)的容器内，脱色摇床染色2h或过夜。②弃去染色液，将凝胶在脱色液I(乙醇：冰乙酸：水＝25：8：65)中继续在摇床上震荡脱色。为脱色完全，需数次更换脱色液I。③当凝胶上的斑点清晰、凝胶背景较浅时，倒去脱色液I，加入脱色液Ⅱ，凝胶置于脱色液Ⅱ(乙醇：冰乙酸：水＝10：15：175)中保存。 (2)快速银染的主要步骤：45％乙醇+5％乙酸固定60min，水洗每次45min，共2次。用0．02％Na2 S2 03 敏化l～2min，水洗每次1min