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- 2025年12月12日
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58
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上海谷研
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-20℃
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瓶
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
One Step SuperRT-PCR Mix Kit在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
产品名称：One Step SuperRT-PCR Mix Kit
别名:一步法逆转录试剂盒
储存条件:-20℃
单位:瓶
产品简介： OneStepRTPremix是一步法（OneStep）RTPCR反应的专用试剂，反应过程在同一管内连续进行，避免开管，能有效防止污染。本品含有高温反转录酶（RNaseH-）和新型热启动酶，采用优化配方的专用Buffer，具有更高的反转录和PCR扩增效率，适合于低浓度RNA模板的高灵敏度扩增。OneStepRTPremix首先采用反转录酶以RNA为模板合成cDNA，然后再以合成的cDNA为模板，经过PCR扩增反应的热变性、引物退火、链延伸三个步骤循环往复，在短时间内扩增得到大量DNA片段，扩增得到的目的产物3’末端含有一个A碱基，可直接用于T/A克隆。产品内容： 25×OneStepRTasemix 5×OneStepRTMixBuffer 保存条件：-20℃保存一年，避免反复冻融。技术说明： 1、 该体系常用50℃进行反转录反应，可以在45℃~60℃范围内进行反转录温度优化；根据反应特征不同，可以在10~30分钟内对反转录时间进行优化； 2、 该体系所用的反转录酶是在MMLV基础上进行了基因改造，去除了RNaseH活性，使其具有更高的温度耐受性和反转录温度，对RNA复杂结构模板具有更高的反转录效率； 3、 该体系具有更好的体系稳定性和适用性，非常适合于病毒、组织等样本提取RNA复杂模板的检测。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
PDF Polyclonal Antibody 种属 Brevibacillus│formosus英文: PDF Polyclonal Antibody 模式菌株no
PSMB4 Polyclonal Antibody 种属 Phyllobacterium│ifriqiyense英文: PSMB4 Polyclonal Antibody 模式菌株no
VIL1 Polyclonal Antibody 种属 Crabtreella│saccharophila英文: VIL1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
HELLS Polyclonal Antibody 种属 Lysobacter│antibioticus英文: HELLS Polyclonal Antibody 模式菌株no
P2RY6 Polyclonal Antibody 种属 Clostridium│clostridiiforme英文: P2RY6 Polyclonal Antibody 模式菌株no
C3AR1 Polyclonal Antibody 种属 Sphingobacterium│kitahiroense英文: C3AR1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
FBXO32 Polyclonal Antibody 种属 Phytobacter│diazotraphicus英文: FBXO32 Polyclonal Antibody 模式菌株no
RBM17 Polyclonal Antibody 种属 Erwinia│chrysanthemi英文: RBM17 Polyclonal Antibody 模式菌株no
Phospho-MAP2K1-T286 Polyclonal Antibody 种属 Shigella│boydii英文: Phospho-MAP2K1-T286 Polyclonal Antibody培养方法
IARS Polyclonal Antibody 种属 Gluconacetobacter│hansenii英文: IARS Polyclonal Antibody应用领域produces 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase produces 3-hydroxysteroid dehydrogenase 3-beta-hydroxysteroid dehydrogenase
HCK Polyclonal Antibody 种属 Lactobacillus│rossiae英文: HCK Polyclonal Antibody应用领域Type strain
HDAC4(N-term) Polyclonal Antibody 种属 Aeromonas│punctata subsp. caviae宿主: Rabbit应用领域培养基：KNO3 2g;MgSO4.7H2PO 2g;K2HPO4 0.5g;酒石酸钾钠 20g;琼脂 20g
SOX8 Polyclonal Antibody 种属 Micromonospora│peucetia英文: SOX8 Polyclonal Antibody应用领域培养基：NH4Cl 0.535g;KH2PO4 0.054g;KCl 0.074g;MgSO4.7H2O 0.049g;CaCl2.2H2O 0.147g;NaCl 0.584g;0.05%红溶液 1ml;微量元素液 1ml;PH7.0-8.0，最适7.8，用0.5gCaCO3或11.9gHEPES调；琼脂 20g
CAPN5 Polyclonal Antibody 种属 Aquaspirillum│arcticum英文: CAPN5 Polyclonal Antibody培养方法
ELAC2 Polyclonal Antibody 种属 Sphingomonas│melonis英文: ELAC2 Polyclonal Antibody培养方法
Cy5标记的兔抗水貂IgG 种属 Leptothrix│discophora英文: Rabbit Mink IgG/Cy5培养方法
One Step SuperRT-PCR Mix Kit人白细胞介素13受体a2elisa检测试剂盒
英文名称:Human IL-13 Rα 2 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:0.15 ng/ml
检测目标:IL-13 Rα 2
应用:Sandwich ELISA
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
One Step SuperRT-PCR Mix Kit在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
产品名称：One Step SuperRT-PCR Mix Kit
别名:一步法逆转录试剂盒
储存条件:-20℃
单位:瓶
产品简介： OneStepRTPremix是一步法（OneStep）RTPCR反应的专用试剂，反应过程在同一管内连续进行，避免开管，能有效防止污染。本品含有高温反转录酶（RNaseH-）和新型热启动酶，采用优化配方的专用Buffer，具有更高的反转录和PCR扩增效率，适合于低浓度RNA模板的高灵敏度扩增。OneStepRTPremix首先采用反转录酶以RNA为模板合成cDNA，然后再以合成的cDNA为模板，经过PCR扩增反应的热变性、引物退火、链延伸三个步骤循环往复，在短时间内扩增得到大量DNA片段，扩增得到的目的产物3’末端含有一个A碱基，可直接用于T/A克隆。产品内容： 25×OneStepRTasemix 5×OneStepRTMixBuffer 保存条件：-20℃保存一年，避免反复冻融。技术说明： 1、 该体系常用50℃进行反转录反应，可以在45℃~60℃范围内进行反转录温度优化；根据反应特征不同，可以在10~30分钟内对反转录时间进行优化； 2、 该体系所用的反转录酶是在MMLV基础上进行了基因改造，去除了RNaseH活性，使其具有更高的温度耐受性和反转录温度，对RNA复杂结构模板具有更高的反转录效率； 3、 该体系具有更好的体系稳定性和适用性，非常适合于病毒、组织等样本提取RNA复杂模板的检测。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
PDF Polyclonal Antibody 种属 Brevibacillus│formosus英文: PDF Polyclonal Antibody 模式菌株no
PSMB4 Polyclonal Antibody 种属 Phyllobacterium│ifriqiyense英文: PSMB4 Polyclonal Antibody 模式菌株no
VIL1 Polyclonal Antibody 种属 Crabtreella│saccharophila英文: VIL1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
HELLS Polyclonal Antibody 种属 Lysobacter│antibioticus英文: HELLS Polyclonal Antibody 模式菌株no
P2RY6 Polyclonal Antibody 种属 Clostridium│clostridiiforme英文: P2RY6 Polyclonal Antibody 模式菌株no
C3AR1 Polyclonal Antibody 种属 Sphingobacterium│kitahiroense英文: C3AR1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
FBXO32 Polyclonal Antibody 种属 Phytobacter│diazotraphicus英文: FBXO32 Polyclonal Antibody 模式菌株no
RBM17 Polyclonal Antibody 种属 Erwinia│chrysanthemi英文: RBM17 Polyclonal Antibody 模式菌株no
Phospho-MAP2K1-T286 Polyclonal Antibody 种属 Shigella│boydii英文: Phospho-MAP2K1-T286 Polyclonal Antibody培养方法
IARS Polyclonal Antibody 种属 Gluconacetobacter│hansenii英文: IARS Polyclonal Antibody应用领域produces 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase produces 3-hydroxysteroid dehydrogenase 3-beta-hydroxysteroid dehydrogenase
HCK Polyclonal Antibody 种属 Lactobacillus│rossiae英文: HCK Polyclonal Antibody应用领域Type strain
HDAC4(N-term) Polyclonal Antibody 种属 Aeromonas│punctata subsp. caviae宿主: Rabbit应用领域培养基：KNO3 2g;MgSO4.7H2PO 2g;K2HPO4 0.5g;酒石酸钾钠 20g;琼脂 20g
SOX8 Polyclonal Antibody 种属 Micromonospora│peucetia英文: SOX8 Polyclonal Antibody应用领域培养基：NH4Cl 0.535g;KH2PO4 0.054g;KCl 0.074g;MgSO4.7H2O 0.049g;CaCl2.2H2O 0.147g;NaCl 0.584g;0.05%红溶液 1ml;微量元素液 1ml;PH7.0-8.0，最适7.8，用0.5gCaCO3或11.9gHEPES调；琼脂 20g
CAPN5 Polyclonal Antibody 种属 Aquaspirillum│arcticum英文: CAPN5 Polyclonal Antibody培养方法
ELAC2 Polyclonal Antibody 种属 Sphingomonas│melonis英文: ELAC2 Polyclonal Antibody培养方法
Cy5标记的兔抗水貂IgG 种属 Leptothrix│discophora英文: Rabbit Mink IgG/Cy5培养方法
One Step SuperRT-PCR Mix Kit人白细胞介素13受体a2elisa检测试剂盒
英文名称:Human IL-13 Rα 2 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:0.15 ng/ml
检测目标:IL-13 Rα 2
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验相关实验
This protocol uses C. therm. Polymerase One-Step RT-PCR system from Roche. 1. Setup master mix 1: 25 mM dNTP 0.8 m l DMSO
Two-Step RT-PCR protocol We will provide both one-step and two-step protocols for RT -PCR . We recommend the two-step protocol for this class. In the one-step protocol, the components of RT and PCR are mixed in a single tube
SuperScript III One-Step RT-PCR System with Platinum® Taq High Fidelity
for 25 or 100 amplification reactions of 50 µl each. Note: This kit has been optimized for end-point RT-PCR. For quantitative real-time RT-PCR, use the SuperScript™ III Platinum® One-Step Quantitative RT-PCR System. 实验
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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