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上海谷研
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瓶
单位:瓶
MagroseHeparin系列磁珠具有快速的磁响应性、丰富的肝素密度、很高的物理化学稳定性等特点。该磁珠产品表面所偶联的肝素带有大量负电性硫酸根离子基团,在一定pH值下,可以与带正电的蛋白具有强的结合能力,同时肝素能够通过特异性亲和与生长因子及抗凝血酶ATⅢ结合,因此,可通过磁性分离的方式快速、高效地从血浆中一步纯化出目标因子。与传统柱层析纯化方式相比,MagroseHeparin系列磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理(如:反复繁琐的离心,费时费力的过滤操作),此外,无需控制流速及柱压,不需要昂贵的层析设备。对于熟练的操作者来说,在很短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取,且能轻松实现多个样品的平行处理,实现高通量的蛋白纯化。该磁珠产品可应用于抗凝血因子III、凝血因子、干扰素、核酸结合蛋白、脂蛋白、蛋白合成因子、限制性内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物分子的分离纯化。产品优势1.丰富的结合位点,加强了与配体的特异性结合 2.磁响应速度快,减少操作时间 3.磁珠具有良好的分散性和重悬性,提高操作的便捷性 4.配基具有良好的物理化学稳定性,提高了实验结果的可靠性及可重复性产品特性
作用及原理:
⒈溶液I—溶菌液:
溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II-NaOH-SDS液:
NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。
但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。
肝素磁珠 Magrose Heparin在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:
(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
(2)解聚细胞中的核蛋白。
(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理,可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一,盐析即在高浓度Nacl溶液中,蛋白质析出的现象。原理如下
(1)Nacl溶液与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;
(2)Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出;
2.不同浓度下DNA分子构象(三维结构)不同,不同的构象溶解度也不同。
(1)当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出;
(2)DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高;
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液,使得蛋白质析出,而DNA溶解度较大,通过高速离心,取上清并去除沉淀,进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂:
原则:不与DNA反应,对其无影响。
1.纯乙醇(二倍体积比);效率高,需要放置的时间短,在公司用Kit提取的时候,没有放置直接进行下一步;确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇,价格相对于纯乙醇便宜,但是会损失DNA;
3.异丙醇(0.6倍体积);
(1)普通细胞上清液体,静止15-30min即可沉淀;
(2)对于含量低,或者组织(比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA),则最好在-20℃放置2h或者以上,
本人提取肝脏组织DNA时候,最长时间放置了三天,对结果并无影响;上周提取细胞中cccDNA的时候,室温放置了15min,结果提出的DNA含量也挺高的,而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高,所以时间短点也可以,但是如果时间不是很着急,还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品:
APT肉汤说明书英文:APT Broth 产品规格:250g 产品用途:用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量盐酸硫酸胺素菌的培养。
乳酸杆菌肉汤培养基供应英文:Lactobacillus broth Medium 产品规格:250g 产品用途:用于乳酸杆菌增菌培养
MRS肉汤说明书英文:MRS Broth 产品规格:250g 产品用途:用于食品中乳酸菌的选择性增菌培养
双歧杆菌BS培养基供应英文:Bifidobacterium BS Medium 产品规格:250g 产品用途:用于双歧杆菌分离培养
氯化血红素说明书英文:hemin 产品规格:1g 产品用途:每支添加PYG液体培养基或TTC琼脂基础或CDC厌氧菌琼脂中
维生素K1说明书英文:vitamin K1 产品规格:1g 产品用途:每支添加PYG液体培养基或TTC琼脂基础或CDC厌氧菌琼脂中
莫匹罗星锂盐说明书英文:产品规格:5mg/支*5支/包 产品用途:每支添加于100ml莫匹罗星锂盐改良MRS培养基中
莫匹罗星锂盐改良MRS培养基说明书英文:Li-Mupirocin MRS Medium,Modified 产品规格:250g 产品用途:用于食品中双歧杆菌的分离培养或计数。
双歧杆菌琼脂培养基说明书英文:Bifidobacterium BS Medium 产品规格:250g 产品用途:用于双歧杆菌的分离培养
含糖牛肉汤培养基特价英文:Beef Broth Medium(with Sugar) 产品规格:250g 产品用途:用于乳酸菌培养
石蕊牛奶培养基价格英文:Litmus Milk Medium 产品规格:250g 产品用途:用于乳酸菌石蕊牛奶凝固试验
肝素磁珠 Magrose Heparin人DANelisa检测试剂盒
英文名称:Human DAN ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:60 pg/ml
检测目标:DAN
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验动物的肥大细胞合成的粘多糖的一种。原来是从肝中得到的抗凝血的物质。作为医药是由肠粘膜等加工而得到的不含蛋白的制剂,已知在生物体内是和其他粘多糖一样,是以与蛋白结合的蛋白聚糖形态而存在,但不象硫酸软骨素那样的细胞外间质成分,似乎可以说它是细胞内成分。肝素的抑制作用必须有辅助因子(co-factor),但它是靠与蛋白质或其他带正电荷的高分子电解质的结合性而实现的,例如凝血酶和肝素辅因子结合成复合体则起抑制凝固作用。多糖链是由L-艾杜糖醛酸、D-葡萄糖醛酸、D-葡萄糖胺组成,硫酸
肝素(heparin)属于糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAGs)类生化药物,是一类在结构上不均一、聚合程度上高度分散的硫酸多糖,一般指肝素钠。低分子量肝素有下面俩种定义:1.分子量在4000~6500道尔顿的肝素具有独特的抗凝特性称为低分子量肝素.与普通肝素一样,低分子量肝素先与抗凝血酶(AT)结合,形成LMWH—AT复合物,该复全物能抑制凝血酶(Fa)和xa因子(Fxa)等凝血因子的活性,从而发挥抗凝血作用2.以往采用的普通肝素是一种分子量不均一的混合物,分子量为3000
抗凝剂肝素: 肝素(heparin)肝素广泛在于肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和暑碱性粒细胞的颗粒中医学教育|网。它是一种含硫酸基团的粘多糖,是分散物质,平均分子量为15000(2000-40000)。 肝素可加强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶,从而具有阻止凝血酶形成,对抗凝血酶和阻止血小板聚集等多种作用。 …… 点击查看:bbs.med66.com/forum-267-250/topic-1674311.html
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