支原体PCR绝对定量标准品
Quantification Standards DNA
符合欧洲药典(EP)和日本药典(JP)要求的支原体检测标准品。欧洲药典第2.6.7章(EP 2.6.7)和日本药典(第17版)第G3章(JP G3)描述了基于NAT(核酸扩增检测的英文简称,包括PCR/qPCR)的支原体检测。如果用NAT法替代培养法检测支原体时,则要求显示每毫升样品体积(CFU/ml)中10个菌落形成单位的检测,即灵敏度需达到10CFU/ml。
支原体PCR绝对定量标准品适用范围:
基于以上检测要求,在质量控制和符合 EP 2.6.7 的检测背景下,还对 PCR 检测的特异性和测试灵敏度进行检验,以符合标准。德国Minerva Biolabs公司的支原体PCR绝对定量标准品(PCR Quantification Standards)可在以上条件下,对qPCR实验的灵敏度和特异性进行检测。
PCR绝对定量标准品含所选微生物物种的纯的、定量的基因组DNA。该产品被设计为辅助定量PCR分析的工具。因此,除方法验证外,支原体PCR定量标准品(PCR Quantification Standards)也适用于常规PCR和qPCR的指定微生物基因组的标准曲线绘制:每一种PCR定量标准品均可通过连续稀释产生特定微生物的基因组DNA标准曲线。
支原体PCR绝对定量标准品可提供以下产品内容:
1、药典 EP第2.6.7章中所列出的所有10种支原体菌株。
定量标准品DNA所属物种 |
货号 |
规格 |
价格 |
口腔支原体 |
52-0112 |
1×108 基因组DNA/管 + 缓冲液2ml/管×3管/盒 |
询价 |
鸡败血支原体 |
52-0115 |
询价 |
莱氏无胆甾原体 |
52-0116 |
询价 |
发酵支原体 |
52-0117 |
询价 |
肺炎支原体 |
52-0119 |
询价 |
关节液支原体 |
52-0124 |
询价 |
精氨酸支原体 |
52-0129 |
询价 |
猪鼻支原体 |
52-0130 |
询价 |
柠檬螺原体 |
52-0164 |
询价 |
唾液支原体 |
52-0103 |
询价 |
百日咳杆菌 |
52-5571 |
询价 |
大肠埃希菌 |
52-0083 |
询价 |
肺炎军团菌 |
52-0101 |
询价 |
铜绿假单胞菌 |
52-0071 |
询价 |
2、额外有:Pseudomonas aeruginosa(Cat. No. 52-0071)、Bordetella pertussis(Cat. No. 52-5571)、Escherichia coli(Cat. No. 52-0083)、Legionella pneumophila(Cat. No. 52-0101)这几种菌株的定量标准品可供选购。
3、从特定微生物中提取的基因组DNA,培养传代次数较低,用于生产标准品的微生物在液体培养基中生长,并在对数生长阶段结束时收获。
4、使用标准化方法分析DNA起始材料,以确定DNA的完整性和数量。
5、只有纯的、完整的、在琼脂糖凝胶中显示> 10 kb 条带的、且OD 260/280 > 1.8的DNA可用于产品生产。
6、从每个培养中分离DNA,通过荧光分析定量,最后稀释以调整最终浓度(每瓶1 × 10^8个基因组拷贝)。
7、每种微生物的身份通过Sanger测序确认,针对基因组中的物种特定区域。冻干PCR定量标准品,提高产品稳定性。
支原体PCR绝对定量标准品复溶操作
1.标准品短时离心,以收集冻干粉至管底。
2.取试剂盒提供的Tris缓冲液(白盖)100 µl,加入到标准品管内(绿盖)。
3.室温下静置5分钟。
4.涡旋混合10秒钟,离心5秒钟。
5.选合适体积的复溶DNA用于PCR扩增或梯度稀释,以制备标准曲线。
多种可选的产品类别
• 符合药典要求的10CFU/100CFU支原体检测灭活标准品:
10 CFU™ Mycoplasma Sensitivity Standards
100 CFU™ Mycoplasma Sensitivity Standards
• 浓度经滴度测定的纯化支原体基因组DNA:
Genomic DNA extracts
效期及储存条件:
每个产品上都注明了到期日期。
未开封的试剂盒应储存在+2至+8°C。
(缔一生物)
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