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ChIP测序 | 核酸-蛋白互作研究

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      武汉康测科技有限公司

    • 服务名称

      ChIP测序 | 核酸-蛋白互作研究

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    核酸-蛋白互作研究系列产品:ChIP测序RIP测序CLIP测序MeRIP测序

    简介

    ChIP-seq是将染色质免疫共沉淀与高通量测序相结合的技术,通过蛋白免疫相互作用,用抗体把和染色质相互作用的蛋白(如组蛋白、转录因子等)沉淀下来,捕捉到细胞内动态的、瞬时的蛋白质与DNA之间的相互作用,从而所获取与其相结合的DNA序列,确定各种转录影响因子以及非组蛋白染色体结合蛋白在染色质上的具体位置。可以一次性得到目的蛋白在整个基因组上的结合分布,得到目的蛋白精确的结合位点以及结合基序等信息,若同时辅以转录组测序,则可以得到目的蛋白对全细胞基因表达的调控模式,大幅提高对目的蛋白的功能认识。

    作为国内核酸-蛋白互作研究服务的领跑者,公司已完成1000多项ChIP-seq、RIP-seq、CLIP-seq实验及测序分析服务,包括动物(人、小鼠、大鼠、羊、鸡、斑马鱼等)、植物(水稻、拟南芥、小麦、二穗短柄草、马铃薯、番茄、苹果等)、微生物(大肠杆菌、禾谷镰刀菌等)近50余种物种的CHIP-seq和RIP-seq,其中组蛋白ChIP-seq成功率接近100%,转录因子ChIP-seq成功率超过95%,RIP-seq、CLIP-seq成功率接近95%。

    康测技术优势

    1. 优化的ChIP实验体系,ChIP建库起始量低至1~30ng DNA;
    2. 武汉康测科技专攻IP(ChIP、RIP、CLIP)的博硕团队,拥有十年丰富的项目经验积累;
    3. 为客户选择抗体提供辅助指导,并对抗体进行质检、效价分析,提供文章发表质量的IP报告;
    4. 特有的Peak calling技术;
    5. 提供个性化的分析报告,可根据客户需要提供关联分析、解析目的蛋白调控机制。


    建库方法                                                       技术流程

    产品细节图片1    产品细节图片2

    分析结果展示

    产品细节图片3

    A:IP质检结果(input:样品裂解液中目的蛋白检测结果,IP:抗体富集目的蛋白检测结果,IgG:IgG富集目的蛋白结检测果);
    B:Reads在基因上下游的分布,结合峰主要位于转录起始位点(TSS)上游区域(ChIP_1/2/3为3个生物学重复);
    C:Peak在基因组各功能区的分布;
    D:Peak的Motif分析。


    武汉康测科技有限公司是由加州大学圣地亚哥分校(UCSD)、武汉大学、华中农业大学博士团队创建的高新技术企业。截至2017年底,团队核心成员已在Nature、Cell、Molecular Cell、Nat. Struct. Mol. Biol.、Proc Natl Acad Sci USA、Cell Reports等国际顶刊发表文章十余篇。公司秉承技术创新、服务至上的核心理念,与多所985/211院校、中国科学院的实验室建立了长期合作关系。

    公司研发团队于2017年成功开发出绝对定量转录组(KC-DigitalRNA)、免疫组库(KC-IRQuant)、16S rDNA绝对定量、ctDNA检测(KC-SMP)等4项建库技术,并成功申请发明专利和配套数据分析系统的软件著作权。成为中国首.家UID(UMI)绝对定量高通量测序服务平台,为广大科研工作者提供转录组(mRNA、lncRNA)/TCR/BCR/ctDNA/肠道微生物多样性等多种绝对定量测序服务。 

     

     

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    • 学会这些,你就是 ChIP 专家

      染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)是一种用于研究目的蛋白在染色质上定位的技术。ChIP 的原理是通过甲醛处理细胞固定 DNA 和蛋白,然后提取染色质,使用超声或酶解将染色质剪切成小片段。 之后使用结合在染色质的目的蛋白或组蛋白修饰特异性抗体富集 DNA 片段。富集的 DNA 片段可以通过 PCR,DNA 芯片或测序进行分析。虽然原理看起来很简单,但 ChIP 是一项非常具有挑战的技术,很多因素都可能导致实验

    • 高通量测序介绍

      受到限制,这部分工作仍然需要传统测序(读取长度达到850 碱基)的协助。但是这并不影响高通量测序技术在全基因组mRNA表达谱,microRNA表达谱,ChIP-chip以及DNA甲基化等方面的应用。 2008年Mortazavi等人对小鼠的大脑、肝脏和骨骼肌进行了RNA 深度测序,这项工作展示了深度测序在转录组研究上的两大进展,表达计数和序列分析。 高通量测序另一个被广泛应用的领域是小分子RNA或非编码RNA(ncRNA)研究测序方法能轻易的解决

    • 做好 ChIP 的四个注意事项

      PCR 和下一代测序分析如下所示。(I) 重要的是,实时 PCR 方法仅可对预先选择的基因组位点进行检测,而 NGS 可让研究者获得基因组上 H3K4me3 和 H3K27me3 标记物和 Ezh2 结合位点的概况。使用该方法获得的信息量很大,ChIP 测序分析因此成为一种适合研究正常发育过程中或病理状态下发生的表观遗传变化的强大工具。

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