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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
49
- 英文名：
FITC Immunofluorescence Detection Kit (Mouse)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100次|300次
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Cy3免疫荧光检测试剂盒(人)价格
英文名称：Cy3 Immunofluorescence Detection Kit (Human)
产品规格：100次|300次
发货周期：1～3天
储存条件冷藏（2-8℃）
概述
免疫荧光检测试剂盒系列用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时，就可以使用免疫荧光检测试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。
本试剂盒含有Cy3标记的驴抗人IgG(H+L)抗体，可以用于检测人来源的相应一抗，在荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下可以观察到鲜艳的红色。
特点
本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。操作简便，灵敏度高。
组份
封闭液；驴抗人Cy3标记二抗；免疫荧光染色二抗稀释液；抗荧光淬灭封片液
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
DL- 盐毒芹0 7 5-025 规格：;20mg
DAIDZEIN DIMETHYLETHER(RG19161 规格：;20mg
CROCETIN, trans-(RG（需干冰运输0 885 规格：;20mg
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CORYNANTHINE(RAUHIMBINE(RG0 812-025 规格：;20mg
CORYNANTHINE(RAUHIMBINE(RG0 812 规格：;20mg
COROSOLIC ACID(P0 78 5 规格：;20mg
COROSOLIC ACID(P0 78 规格：;20mg
CORALYNE CHLORIDE, (--(RG0 775-250 规格：;20mg
CORALYNE CHLORIDE, (--(RG0 775-100 规格：;20mg
COPTISINE CHLORIDE(RG0 7705 规格：;20mg
COPTISINE CHLORIDE(RG0 770 规格：;20mg
CONIFERYL ALCOHOL(RG0 725-100 规格：;20mg
CIWUJIANOSIDE B (RG0 6901 规格：;20mg
CITRIC ACID(RG0 6821 规格：;20mg
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操作步骤(仅供参考)：
1、Cy3免疫荧光检测试剂盒(人)价格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验konglingrufeng 之前实验设计 A组 小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1)+阳性诱导剂+培养基 B组 小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1)+实验诱导剂+培养基 C组 小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1)+阳性诱导剂+实验诱导剂+培养基 D组 小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1)+培养基 诱导相同天数后在免疫荧光结合共聚焦显微镜技术下，半定量测定OPG/RANKL表达，差异有统计学意义
在免疫荧光染色过程中单染和共染是常用的两种方式，除此之外我们还可能会用到远红外进行染色标记。这相对于前两者实验操作上处理方法是一致的，唯独在样品处理上有所不同，而导致荧光定位标记的颜色增多，相对而言变得复杂。免疫荧光技术主要是通过抗体与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。那么接下来，我们重点来介绍免疫荧光操作方法以及注意事项。操作步骤：1. 首先，在常温下将组织切片用免疫组化笔进行画圈，接着加入 0.1M PB 约 50 微升左右，进行每次 20 分钟的漂洗，漂洗
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