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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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34
- 英文名：
Annexin V-PE Apoptosis Detection Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20次
操作步骤(仅供参考)：
1、Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒价格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒价格
英文名称：Annexin V-PE Apoptosis Detection Kit
产品规格：20次
发货周期：1～3天
本试剂盒是用PE(藻红蛋白标记的重组人AnexinV来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。一个包装的本试剂盒共可以检测20个样品。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。本试剂盒检测的是红色荧光，因此在待检测的细胞已经表达GFP等绿色荧光蛋白的情况下，特别适合使用本试剂盒检测细胞凋亡。PE可以被495nm、545或564nm的激发光所激发，发出峰值为575nm的荧光。(参考下图)
Anexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白，参与细胞内的信号转导。但仅AnexinV被报道可以调控一些PKC的活性。
AnexinV选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)。磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而AnexinV和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。
用带有红色荧光的荧光探针PE标记的AnexinV，即AnexinV-PE，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。
正常细胞不会被AnexinV-PE所染色，凋亡细胞和坏死细胞都会被AnexinV-PE所染色。如果希望进一步区分凋亡和坏死细胞，可以使用其它细胞凋亡检测试剂盒进行检测。
储存条件4℃避光，有效期6个月。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
顺式-1,2-环二胺无水四硼酸钠/无水硼砂/无水硼酸钠/无水四硼/酸式硼酸钠/焦硼酸钠/硼钠/熔融硼砂/Sodium tetraborate decahydrate
1-三苯基膦-2-酮十水四硼酸钠/硼砂/黄月砂/月石砂/硼酸钠/Sodium tetraborate decahydrate
六邻苯二酰亚胺硼酸/Boric acid
3--2-氟溴苯2，5-二羟酸/龙胆酸/5-羟基水杨酸/DHB
BOC-L-焦谷氨酸酯六基磷酰三胺/六胺/三(二氨基)氧膦/HMPT/HMPA
5--2-羟酮三异辛胺/三异辛基胺/Triisooctylamine
2-氧基吡啶盐酸三胺/三胺盐酸盐/三基化铵/盐酸氨基三烷/Trimethylamine hydrochloride
2-溴-3-基噻吩盐酸三胺/三胺盐酸盐/三基化铵/N,N-二基胺盐酸盐/化四胺/Triethylamine hydrochloride
4-水杨酸-5-磺酰胺三异胺/三(3-基基)胺/三异戊基胺/Triisoamylamine
[(1R)-(内型,反式)]-(+)-3-溴樟脑-8-磺酸铵盐二苯基胺/N,N-二苯基胺/N,N-二苯对苯二氨基/ N,N-二苯基二胺/N,N-二苯对氨基/N,N-Diphenylbenzidine
Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒价格小鼠心肌细胞 规格20mg Mouse sP-selectin ELISA Kit
小鼠间充质干细胞-骨髓 规格20mg Mouse sE-selectin[CD-62E] ELISA Kit
小鼠胚胎成纤维细胞 规格20mg Mouse Soluble CD40 ligand ELISA Kit
马间充质干细胞-脂肪 规格20mg Mouse AEA（IgG，M）ELISA Kit
狗间充质干细胞-脂肪 规格20mg Mouse pANCA ELISA Kit
猪角膜上皮细胞 规格20mg Mouse HRAb IgM ELISA Kit
猪晶状体上皮细胞 规格20mg Mouse HRAb IgG ELISA Kit
内皮细胞培养基 规格20mg Mouse anticardiacmuscle antibody ELISA Kit
平滑肌细胞培养基 规格20mg Mouse ANCA ELISA Kit
周边细胞培养基 规格20mg Mouse anti-thrombin receptor ELISA Kit
脑膜细胞培养基 规格20mg Mouse AT-III ELISA Kit
神经前体细胞培养基 规格20mg Mouse tartRate-resistant acid phosphatase orm 5b ELISA Kit
神经前体细胞分化培养基 规格20mg Mouse SPE(IgG,M) ELISA Kit
少突胶质细胞培养基 规格20mg Mouse antinuclear antibody ELISA KIT
少突胶质前体细胞分化培养基 规格20mg Mouse TRAb ELISA Kit
1、Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒价格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒价格
英文名称：Annexin V-PE Apoptosis Detection Kit
产品规格：20次
发货周期：1～3天
本试剂盒是用PE(藻红蛋白标记的重组人AnexinV来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。一个包装的本试剂盒共可以检测20个样品。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。本试剂盒检测的是红色荧光，因此在待检测的细胞已经表达GFP等绿色荧光蛋白的情况下，特别适合使用本试剂盒检测细胞凋亡。PE可以被495nm、545或564nm的激发光所激发，发出峰值为575nm的荧光。(参考下图)
Anexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白，参与细胞内的信号转导。但仅AnexinV被报道可以调控一些PKC的活性。
AnexinV选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)。磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而AnexinV和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。
用带有红色荧光的荧光探针PE标记的AnexinV，即AnexinV-PE，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。
正常细胞不会被AnexinV-PE所染色，凋亡细胞和坏死细胞都会被AnexinV-PE所染色。如果希望进一步区分凋亡和坏死细胞，可以使用其它细胞凋亡检测试剂盒进行检测。
储存条件4℃避光，有效期6个月。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
顺式-1,2-环二胺无水四硼酸钠/无水硼砂/无水硼酸钠/无水四硼/酸式硼酸钠/焦硼酸钠/硼钠/熔融硼砂/Sodium tetraborate decahydrate
1-三苯基膦-2-酮十水四硼酸钠/硼砂/黄月砂/月石砂/硼酸钠/Sodium tetraborate decahydrate
六邻苯二酰亚胺硼酸/Boric acid
3--2-氟溴苯2，5-二羟酸/龙胆酸/5-羟基水杨酸/DHB
BOC-L-焦谷氨酸酯六基磷酰三胺/六胺/三(二氨基)氧膦/HMPT/HMPA
5--2-羟酮三异辛胺/三异辛基胺/Triisooctylamine
2-氧基吡啶盐酸三胺/三胺盐酸盐/三基化铵/盐酸氨基三烷/Trimethylamine hydrochloride
2-溴-3-基噻吩盐酸三胺/三胺盐酸盐/三基化铵/N,N-二基胺盐酸盐/化四胺/Triethylamine hydrochloride
4-水杨酸-5-磺酰胺三异胺/三(3-基基)胺/三异戊基胺/Triisoamylamine
[(1R)-(内型,反式)]-(+)-3-溴樟脑-8-磺酸铵盐二苯基胺/N,N-二苯基胺/N,N-二苯对苯二氨基/ N,N-二苯基二胺/N,N-二苯对氨基/N,N-Diphenylbenzidine
Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒价格小鼠心肌细胞 规格20mg Mouse sP-selectin ELISA Kit
小鼠间充质干细胞-骨髓 规格20mg Mouse sE-selectin[CD-62E] ELISA Kit
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猪晶状体上皮细胞 规格20mg Mouse HRAb IgG ELISA Kit
内皮细胞培养基 规格20mg Mouse anticardiacmuscle antibody ELISA Kit
平滑肌细胞培养基 规格20mg Mouse ANCA ELISA Kit
周边细胞培养基 规格20mg Mouse anti-thrombin receptor ELISA Kit
脑膜细胞培养基 规格20mg Mouse AT-III ELISA Kit
神经前体细胞培养基 规格20mg Mouse tartRate-resistant acid phosphatase orm 5b ELISA Kit
神经前体细胞分化培养基 规格20mg Mouse SPE(IgG,M) ELISA Kit
少突胶质细胞培养基 规格20mg Mouse antinuclear antibody ELISA KIT
少突胶质前体细胞分化培养基 规格20mg Mouse TRAb ELISA Kit
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文献和实验相关实验
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行荧光素（FITC、PE）或biotin标记，以标记了的Annexin-V作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶(propidine iodide
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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