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- 2025年07月14日
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- 详细信息
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52
- 英文名：
Cell proliferation tracer fluorescence probe
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5mg
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)规格
英文名称：Cell proliferation tracer fluorescence probe
产品规格：5mg
发货周期：1～3天
本品是一种近年来被广泛应用的细胞增殖检测用荧光探针，也可以用于细胞的荧光示踪。基于CFDASE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致，但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDASE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数，同时如果和其它荧光探针联用，可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。
CAS150347-59-4
分子式C29H19NO11
分子量557.47
CFDASE可以通透细胞膜，进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应，并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDASE后大约24小时，即可充分标记细胞。被CFDASE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。CFDASE标记细胞的荧光非常均一，比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。
由于CFDASE标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。采用CFDASE通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。每一个峰代表一种分裂次数的细胞，从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。分裂次数较多后，分裂0次或1次等没有分裂或分裂次数较少的细胞会逐渐减少直至检测不到。
使用CFDASE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。目前CFDASE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测，甚至还可以用于细菌增殖的检测。
CFDASE标记细胞呈绿色荧光，检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为518nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1detectionchanel。CFDASE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。CFDASE标记的细胞无论在体外还是体内都不会使邻近细胞染色。即CFDASE荧光探针完成标记后不会从一个细胞转移到邻近细胞。CFDASE标记细胞仅需5-15分钟即可完成。对于不同细胞，最佳标记时间需自行摸索。
CFDASE可以使用无水DMSO(anhydrousDMSO)配制，配制浓度通常为2-10mM。配制好的溶液宜当天使用完毕，不宜长时间保存。CFDASE标记细胞时的最终浓度通常为0.2-10μM或更高一些。在工作浓度为5μM时，一个包装的本产品共可以标记约1.8升的细胞。
储存条件-20℃，有效期6个月。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
2,3,5-三吡啶聚烯醇/PVA
L-天门冬氨酸二酯盐酸盐巯基酸/硫代醇酸/硫醇代酸/硫基酸/硫基酸/硫醇酸/TGA
4-异硼酸(含有数量不等的酸酐)β-巯基醇/2-巯基醇/硫醇基醇/硫代二醇/β-Mercaptoethanol
4-(4-基嗪)二醇/甘醇/亚基二醇/1,2-二醇/1,2-亚基二醇/撑二醇/Ethylene glycol
2',3'-二-O-酰基-5'-脱氧-5-氟-D-胞啶聚二醇35000/聚氧烯35000/PEG35000
2-基-5-基吡啶聚二醇20000/聚氧烯20000/聚二醇20M/PEG20000
3,5-二叔基-4-羟聚二醇10000/聚氧烯10000/PEG10000
磷酸二苄基酯聚二醇8000/聚氧烯8000/PEG8000
N-氧羰基-L-叔亮氨酸聚二醇6000/聚氧烯6000/PEG6000
间扁桃酸聚二醇4000/聚氧烯4000/PEG4000
细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)规格支气管上皮细胞裂解物 规格100mg Mouse Adenosinetriphosphatase ELISA Kit
气管上皮细胞裂解物 规格20mg Mouse apelin-12 ELISA Kit
小气道上皮细胞裂解物 规格100mg Mouse Apelin-12 ELISA KIT
肺成纤维细胞裂解物 规格20mg Mouse Apelin-12 ELISA Kit
支气管平滑肌细胞裂解物 规格20mg Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit
气管平滑肌细胞裂解物 规格20mg Mouse AGRP ELISA Kit
骨骼肌细胞裂解物 规格20mg Mouse 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA KIT
骨骼肌卫生细胞裂解物 规格20mg Mouse 8-iso-Prostaglandin F2a
骨骼肌成肌细胞裂解物 规格20mg Mouse 8-hydroxy-2-deoxyguanosine ELISA Kit
肾小球内皮细胞裂解物 规格20mg Mouse 6-keto-prostaglandin elisa kit
肾近曲小管上皮细胞裂解物 规格20mg Mouse Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit
肾皮质上皮细胞裂解物 规格20mg Mouse 25(OH)D3 ELISA Kit
肾上皮细胞裂解物 规格20mg Mouse17-KS ELISA KIT
肾系膜细胞裂解物 规格20mg Mouse 17-ANP ELISA Kit
膀胱平滑肌细胞裂解物 规格20mg Mouse17-Hydroxycorticosteroids ELISA KIT
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)规格
英文名称：Cell proliferation tracer fluorescence probe
产品规格：5mg
发货周期：1～3天
本品是一种近年来被广泛应用的细胞增殖检测用荧光探针，也可以用于细胞的荧光示踪。基于CFDASE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致，但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDASE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数，同时如果和其它荧光探针联用，可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。
CAS150347-59-4
分子式C29H19NO11
分子量557.47
CFDASE可以通透细胞膜，进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应，并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDASE后大约24小时，即可充分标记细胞。被CFDASE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。CFDASE标记细胞的荧光非常均一，比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。
由于CFDASE标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。采用CFDASE通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。每一个峰代表一种分裂次数的细胞，从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。分裂次数较多后，分裂0次或1次等没有分裂或分裂次数较少的细胞会逐渐减少直至检测不到。
使用CFDASE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。目前CFDASE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测，甚至还可以用于细菌增殖的检测。
CFDASE标记细胞呈绿色荧光，检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为518nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1detectionchanel。CFDASE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。CFDASE标记的细胞无论在体外还是体内都不会使邻近细胞染色。即CFDASE荧光探针完成标记后不会从一个细胞转移到邻近细胞。CFDASE标记细胞仅需5-15分钟即可完成。对于不同细胞，最佳标记时间需自行摸索。
CFDASE可以使用无水DMSO(anhydrousDMSO)配制，配制浓度通常为2-10mM。配制好的溶液宜当天使用完毕，不宜长时间保存。CFDASE标记细胞时的最终浓度通常为0.2-10μM或更高一些。在工作浓度为5μM时，一个包装的本产品共可以标记约1.8升的细胞。
储存条件-20℃，有效期6个月。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
2,3,5-三吡啶聚烯醇/PVA
L-天门冬氨酸二酯盐酸盐巯基酸/硫代醇酸/硫醇代酸/硫基酸/硫基酸/硫醇酸/TGA
4-异硼酸(含有数量不等的酸酐)β-巯基醇/2-巯基醇/硫醇基醇/硫代二醇/β-Mercaptoethanol
4-(4-基嗪)二醇/甘醇/亚基二醇/1,2-二醇/1,2-亚基二醇/撑二醇/Ethylene glycol
2',3'-二-O-酰基-5'-脱氧-5-氟-D-胞啶聚二醇35000/聚氧烯35000/PEG35000
2-基-5-基吡啶聚二醇20000/聚氧烯20000/聚二醇20M/PEG20000
3,5-二叔基-4-羟聚二醇10000/聚氧烯10000/PEG10000
磷酸二苄基酯聚二醇8000/聚氧烯8000/PEG8000
N-氧羰基-L-叔亮氨酸聚二醇6000/聚氧烯6000/PEG6000
间扁桃酸聚二醇4000/聚氧烯4000/PEG4000
细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)规格支气管上皮细胞裂解物 规格100mg Mouse Adenosinetriphosphatase ELISA Kit
气管上皮细胞裂解物 规格20mg Mouse apelin-12 ELISA Kit
小气道上皮细胞裂解物 规格100mg Mouse Apelin-12 ELISA KIT
肺成纤维细胞裂解物 规格20mg Mouse Apelin-12 ELISA Kit
支气管平滑肌细胞裂解物 规格20mg Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit
气管平滑肌细胞裂解物 规格20mg Mouse AGRP ELISA Kit
骨骼肌细胞裂解物 规格20mg Mouse 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA KIT
骨骼肌卫生细胞裂解物 规格20mg Mouse 8-iso-Prostaglandin F2a
骨骼肌成肌细胞裂解物 规格20mg Mouse 8-hydroxy-2-deoxyguanosine ELISA Kit
肾小球内皮细胞裂解物 规格20mg Mouse 6-keto-prostaglandin elisa kit
肾近曲小管上皮细胞裂解物 规格20mg Mouse Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit
肾皮质上皮细胞裂解物 规格20mg Mouse 25(OH)D3 ELISA Kit
肾上皮细胞裂解物 规格20mg Mouse17-KS ELISA KIT
肾系膜细胞裂解物 规格20mg Mouse 17-ANP ELISA Kit
膀胱平滑肌细胞裂解物 规格20mg Mouse17-Hydroxycorticosteroids ELISA KIT
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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一、固定液使用 固定相: AT SE-30,AT OV-1 组成 100%甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 碳氢化合物 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度 50―300 固定相: AT OV-101 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体） 极性 非极性 应用 氨基酸、基油 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100 使用温度 0―350 固定相: AT SE-52
一、固定液使用 固定相: AT SE-30,AT OV-1 组成 100%甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 碳氢化合物 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度 50―300℃ 固定相: AT OV-101 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体） 极性 非极性 应用 氨基酸、基油 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100 使用温度 0―350℃ 固定相: AT SE-52AT SE
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