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双荧光素酶报告基因实验

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  • 2025年12月16日
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      荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly 
    aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界能够发光的生物。 
       自然界存在的荧光素酶来自萤火虫、发光细菌、发光海星、发光节虫、发
    光鱼、发光甲虫等。细菌荧光素酶对热敏感,因此在哺乳细胞的应用中受到
    限制。目前,以北美萤火虫虫(Photinus pyralis)来源的荧光素酶基因应用的最
    为广泛,该基因可编码 550 个氨基酸的荧光素酶蛋白,是一个 61kDa 的单体
    酶,无需表达后修饰,直接具有完全酶活

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    • 【求助】报告基因实验

      gene122 本人遗传学准研究生,现在在实验室,看到有报告基因实验,但是不知道这个实验的原理及目的,哪位好心人解释下 zhujoker 这个原理已经在这个版块讨论过了,自己学会搜索吧! 下面链接有一些初步的介绍:http://www.biox.cn/content/20050411/10190.htm 3090547 多多自己动手 本文由丁香园论坛提供,想了解更多

    • 双荧光素酶报告基因测试

      在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品

    • 双荧光素酶报告基因实验的一些影响因素及注意

      1.报告基因检测受多种因素影响(载体状态、细胞状态、转染量、转染效率、裂解效率、加样精度、检测过程等),因此同批次样品检测值也可能出现浮动。所以实验一般需要做3个或3个以上复孔,并且引入另一个报告基因作为内参。 2.细胞培养时间不宜过长,12-36h内最好;长时间培养后,细胞难裂解。 3.双荧光素酶报告基因的载体选择:

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