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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
56
- 英文名：
Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20T
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格
英文名称：Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
产品规格：20T
发货周期：1～3天
AnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒是用荧光素APC标记的AnexinV作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Anexin-V（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外，本试剂盒中提供的7-AAD可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。7-AAD是一种核酸染料，同PI有着相似的荧光特性，但其发射光谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与AnexinV联合使用。该染料不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可穿透晚期凋亡细胞或者坏死细胞并与其内的DNA结合。因此将AnexinV-APC与7-AAD联合使用时，7-AAD则被排除在活细胞（AnexinV-/7-AAD-）和早期凋亡细胞（AnexinV+/7-AAD-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被AnexinV-APC和7-AAD结合染色呈现双阳性（AnexinV+/7-AAD+）。
试剂盒组份
重组人AnexinV/APC*（rhAnexinV/APC）———100μl
7-AADViabilityStainingSolution——————100μl
1×Bindingbuffer——————————————10ml
储存条件4℃，有效期一年。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
2,6-二-3-啶乳香胶/乳香/玛帝树胶/玛帝脂/Gum mastic
酸叶醇酯但马胶/但马树脂/达麻脂/Gum dammar
N-基-N-基间橄榄油/洋橄榄油/Olive oil
N-Boc-3-啶酸酯香柏油/柏木油/桧油/洋杉木油/金松油/Cedarwood oil
5--2-酸土耳其红油/太古油/蓖麻油酸/红油/渗透油CTH/化蓖麻油/化蓖麻油/Castor oil sulfonate
N-基-N-香油/子香油/香叶油/Clove oil
1,2,3-三桂皮油/桂油/肉桂油/玉桂油/山扁豆油/Cinnamon oil
beta-紫罗兰蓖麻油/Castor oil
AMP盐佛手油/香柠檬油/枸橼油/香橼油/佛手柑油/保加莫油/Bergamot Oil
4--4-氧代酸酯切片石蜡/石蜡/石油蜡/石油烃蜡/Paraffin with ceresin
AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（250-15000bp） 规格HPLC≥98%;20mgHarpagide
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（300-10000bp） 规格HPLC≥98%;20mgHecogenin
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（50-500bp） 规格HPLC≥98%;10mgSec-O-Glucosylhamaudol
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（pBR322/BstN I） 规格HPLC≥98%;10mgWogonoside
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（pBR322/MspI） 规格HPLC≥98%;10mgWogonin
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（pUC19/MspI） 规格HPLC≥98%;10mgLigustilide
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（λ-EcoT14 I） 规格HPLC≥98%;10mgArtemether
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（λ/EcoRI+HindIII） 规格HPLC≥98%;0.2mLHonokiol
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（λDNA/BstE II） 规格HPLC≥98%;20mgNuciferine
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（λDNA/EcoR I） 规格HPLC≥98%;20mgSalidroside
miRNA电泳分子量标准（miRNA marker） 规格HPLC≥98%;20mgOrientin
Southern Marker DL2000（DIG）（见关联产品） 规格HPLC≥98%;10mgMagnolol
Southern Marker DL2000（生物素）（见关联产品） 规格HPLC≥98%;10mgPicroside I
Southern Marker Oligo（DIG）（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgPicroside II
Southern Marker Oligo（生物素）（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgPicroside III
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格
英文名称：Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
产品规格：20T
发货周期：1～3天
AnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒是用荧光素APC标记的AnexinV作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Anexin-V（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外，本试剂盒中提供的7-AAD可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。7-AAD是一种核酸染料，同PI有着相似的荧光特性，但其发射光谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与AnexinV联合使用。该染料不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可穿透晚期凋亡细胞或者坏死细胞并与其内的DNA结合。因此将AnexinV-APC与7-AAD联合使用时，7-AAD则被排除在活细胞（AnexinV-/7-AAD-）和早期凋亡细胞（AnexinV+/7-AAD-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被AnexinV-APC和7-AAD结合染色呈现双阳性（AnexinV+/7-AAD+）。
试剂盒组份
重组人AnexinV/APC*（rhAnexinV/APC）———100μl
7-AADViabilityStainingSolution——————100μl
1×Bindingbuffer——————————————10ml
储存条件4℃，有效期一年。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
2,6-二-3-啶乳香胶/乳香/玛帝树胶/玛帝脂/Gum mastic
酸叶醇酯但马胶/但马树脂/达麻脂/Gum dammar
N-基-N-基间橄榄油/洋橄榄油/Olive oil
N-Boc-3-啶酸酯香柏油/柏木油/桧油/洋杉木油/金松油/Cedarwood oil
5--2-酸土耳其红油/太古油/蓖麻油酸/红油/渗透油CTH/化蓖麻油/化蓖麻油/Castor oil sulfonate
N-基-N-香油/子香油/香叶油/Clove oil
1,2,3-三桂皮油/桂油/肉桂油/玉桂油/山扁豆油/Cinnamon oil
beta-紫罗兰蓖麻油/Castor oil
AMP盐佛手油/香柠檬油/枸橼油/香橼油/佛手柑油/保加莫油/Bergamot Oil
4--4-氧代酸酯切片石蜡/石蜡/石油蜡/石油烃蜡/Paraffin with ceresin
AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（250-15000bp） 规格HPLC≥98%;20mgHarpagide
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（300-10000bp） 规格HPLC≥98%;20mgHecogenin
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（50-500bp） 规格HPLC≥98%;10mgSec-O-Glucosylhamaudol
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（pBR322/BstN I） 规格HPLC≥98%;10mgWogonoside
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（pBR322/MspI） 规格HPLC≥98%;10mgWogonin
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（pUC19/MspI） 规格HPLC≥98%;10mgLigustilide
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（λ-EcoT14 I） 规格HPLC≥98%;10mgArtemether
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（λ/EcoRI+HindIII） 规格HPLC≥98%;0.2mLHonokiol
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（λDNA/BstE II） 规格HPLC≥98%;20mgNuciferine
DNA电泳分子量标准系列（DNA marker）（λDNA/EcoR I） 规格HPLC≥98%;20mgSalidroside
miRNA电泳分子量标准（miRNA marker） 规格HPLC≥98%;20mgOrientin
Southern Marker DL2000（DIG）（见关联产品） 规格HPLC≥98%;10mgMagnolol
Southern Marker DL2000（生物素）（见关联产品） 规格HPLC≥98%;10mgPicroside I
Southern Marker Oligo（DIG）（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgPicroside II
Southern Marker Oligo（生物素）（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgPicroside III
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验相关实验
Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
一、概述 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡最早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧，这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。 AnnexinV是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。 碘化丙啶（Propidium Iodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞
：敏感度高，适合于检测少量样本，小部分凋亡细胞。如临床活组织检测。 Fasta921 zhaohu552211 wrote:感谢大家！我现在做的是大鼠的肝脏组织，不是细胞，在这种情况下我可以做AnnexV嘛？我知道AnnexV可以做细胞的，如果可以做组织的话，我定那家的试剂盒，具体要注意什么？ 听说这个电泳很难掌握条件！再次感谢大家！ 兄弟，貌似做AnnexinV国产很多不能做组织，呵呵！我没做过组织，没经验，提供点资料看看！美国ADL Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒
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