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28
- 英文名:
Corning?175cm2AngledNeckCellCultureFlaskwithVentCap
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
包
规格: 包
英文名称 Corning?175cm2AngledNeckCellCultureFlaskwithVentCap
单位 5个/包,10包/箱
Corning431080透气培养瓶生长面积(CM2)75数量/包装5个/包,20包/箱
体积750ml
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
1.T175培养瓶正方斜口带滤膜175cm2Corning.价格具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
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人血纤维蛋白溶酶原(Plasminogen)ELISA试剂盒 3.12-200 ng/mL
PNLIP 抗體, 兔單抗 IHC-P 50 µg
PDGFRA / CD140a 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD116 / GM-CSFR 抗體, 鼠單抗 FCM 50 µg
ELISA Kit for Human Neutrophil elastase 78-5000 pg/mL
人蛋白激酶Cα(PKC-A)ELISA试剂盒 0.156-10 ng/mL
PI3 / Elafin / WFDC14 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
ELISA Kit for Human Myosin light chain kinase, smooth muscle 0.156-10 ng/mL
ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
鲤春病毒(SVCV)核酸检测试剂盒(RT-PCR法) 0.312-20 ng/mL
SAA4 抗體 (PE), 鼠單抗 25 Test
SMARCA4 / BRG1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB IF IP ICC/IF 50 µg
T175培养瓶正方斜口带滤膜175cm2Corning.价格4,5-去亚异丙基托吡酯 4,5-Desisopropylidene Topiramate 106881-41-8 质量规格:进口
油酸乙酯(>70.0%(GC)) Ethyl Oleate 111-62-6 质量规格:>70.0%(GC)
羊抗小鼠IgG-RBITC 0.5ml 支
丁香酸(标准品) Syringic acid 530-57-4 质量规格:HPLC≥98%,标准品
改良型石复红染液(酚品红染液) 1ml 瓶
美曲勃龙(R-1881) Methyltrienolone 965-93-5 质量规格:>98%,BR
Hippuric acid 马尿酸 25g 瓶
5-氨基水杨酸,美沙拉秦(标准品) 5-Aminosalicylic acid 89-57-6 质量规格:>98%(T),标准品
4-苄氧基(>98.0%(GC)) 4-Benzyloxybenzaldehyde 4397-53-9 质量规格:>98.0%(GC)
西酞普兰N-氧化物 Citalopram N-Oxide 63284-72-0 质量规格:进口
铬粉(>99%,BR) Chromium powder 7440-47-3 质量规格:>99%,BR
氨氯地平(标准品) Amlodipine 88150-42-9 质量规格:HPLC>98%,标准品
Calcium Chloride 化钙 5g 瓶
阿尔法骨化醇 alfacalcidol 41294-56-8 质量规格:>99%
阿扎司琼 Azasetron HCl 123040-69-7 质量规格:>98.5%,BR
格列本脲(标准品) Glyburide/Gliebenclamide 10238--8 质量规格:HPLC>98%,标准品
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文献和实验改性处理后,可以让细胞更好的进行贴壁培养,这样根据细胞贴壁面积又可以分为25~175cm2多种。 国产的 细胞培养 瓶一般盖子都是封闭的,不带内垫,常用于密闭培养,可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多:密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的,聚酯盖常用于开放培养,只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。透气盖是在瓶盖中加了0.2μm疏水滤膜,提供无菌气体交换,减少污染的风险。常用于开放培养,推荐用于CO2
分钟),使用完后立即清洗,烘干,以备下一次重复使用。 我们用这种滤器配合带螺旋口的培养液滤瓶,采用用负压抽滤过滤培养液。一般放一张滤膜(0.22或0.45), 或者两张(0.22上面再放一张0.45)。虽然该滤器一次只能存放250ml,但一般至少过滤1000ml。 在过滤前,在滤膜上再放 1张或2张普通滤纸,则可以减轻堵塞现象,一般可以过滤2000ml培养液。 虽然没有使用过,但这种滤器的结构可用于正压过滤,因为这种滤器有一个可密封(带有硅胶垫圈)的盖子,盖子上有可以连接正压泵胶管的进
清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70% ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。 3. 小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。 4. 工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验
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