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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存：
31
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
包
1. T175培养瓶正方斜口带滤膜175cm2Corning.说明书具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及研发性企业有着合作关系，还与国际接轨，我司代理多种知名的国际品牌，如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa，Abnova，GenWay等。
产品名称：T175培养瓶正方斜口带滤膜175cm2Corning.说明书
英文名称 Corning?175cm2AngledNeckCellCultureFlaskwithVentCap
单位 5个/包，10包/箱
Corning431080透气培养瓶生长面积(CM2）75数量/包装5个/包,20包/箱
体积750ml
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
下列产品是公司正在促销打折：
ISP培养基250g用于链霉菌的培养
李斯特菌显色培养基 用于产单核李斯特菌的分离和鉴定 1000ml incubation media 李斯特菌显色培养基 用于产单核李斯特菌的分离和鉴定 1000ml
郎比可假丝酵母 产生素A、B。 支/瓶
三糖铁管5ml*20支/包用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选
TripleSugarIronAgar
幽门螺旋杆菌固体培养基250g用于幽门螺杆菌的分离培养
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安络小皮伞菌、鬼毛针、黑柄皮伞菌 药用 支/瓶
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沙氏葡萄糖氯霉素琼脂 250g 用于化妆品中白色念球菌分离培养
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含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE) 300ml/袋*10 用于单增李氏菌增菌培养（SN、GB标准）
TrypticaseSoy-YeastExtractBroth
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小鼠心肌成纤维细胞培养试剂盒 小鼠心肌成纤维细胞培养试剂盒 试剂盒
小鼠血管内皮细胞培养试剂盒 小鼠血管内皮细胞培养试剂盒 试剂盒
小鼠肠微血管细胞培养试剂盒 小鼠肠微血管细胞培养试剂盒 试剂盒
小鼠主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 小鼠主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 试剂盒
T175培养瓶正方斜口带滤膜175cm2Corning.说明书仓鼠肾细胞;HL-1
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]
CDK1 Others Human 人 CDC2 Kinase / CDK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
VERO细胞，非洲绿猴肾细胞 人大细胞肺癌细胞,NCI-H661细胞 CL-0420R 1610(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2
H9c2大鼠心肌细胞(ATCC来源)
GRN Others Human 人 Granulin / GRN 人细胞裂解液 (阳性对照)
注意事项：
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测，反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质，在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水（1:9）稀释至 1×备用。
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文献和实验改性处理后，可以让细胞更好的进行贴壁培养，这样根据细胞贴壁面积又可以分为25～175cm2多种。 国产的 细胞培养 瓶一般盖子都是封闭的，不带内垫，常用于密闭培养，可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多：密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的，聚酯盖常用于开放培养，只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。透气盖是在瓶盖中加了0.2μm疏水滤膜，提供无菌气体交换，减少污染的风险。常用于开放培养，推荐用于CO2
分钟），使用完后立即清洗，烘干，以备下一次重复使用。 我们用这种滤器配合带螺旋口的培养液滤瓶，采用用负压抽滤过滤培养液。一般放一张滤膜（0.22或0.45)， 或者两张（0.22上面再放一张0.45)。虽然该滤器一次只能存放250ml，但一般至少过滤1000ml。 在过滤前，在滤膜上再放 1张或2张普通滤纸，则可以减轻堵塞现象，一般可以过滤2000ml培养液。 虽然没有使用过，但这种滤器的结构可用于正压过滤，因为这种滤器有一个可密封（带有硅胶垫圈）的盖子，盖子上有可以连接正压泵胶管的进
液。 2.用D-PBS 洗涤细胞一至二次。 3.加入trypsin-EDTA 溶液(1ml/25cm2, 2ml/75cm2)，37 ℃ 作用数分钟，于倒立显微镜下观察，当细胞将要分离而呈现圆粒状时，吸掉trypsin-EDTA 溶 液。(若不移去trypsin-EDTA，则在 trypsin-EDTA trypsin作用后，加入适量含血清 之新鲜培养基终止作用，离心后再吸掉上清液。 4.轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量之新鲜培养基，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶
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