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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
RecombinantHumanGM-CSF/CSF2
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10ug
规格: 10ug
KnownasGranulocyte-macrophagecolony-stimulatingfactor;Colony-stimulatingfactor;CSF;MolgramostinandSargramostim.
DerivedfromHumancells
PurityGreaterthan95%asdeterminedbyreducingSDS-PAGE.
FormulationLyophilizedfroma0.2μmfilteredsolutionof20mMPB,
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
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ELISA Kit for Human Serpin B13 1.56-100 ng/ml
人白介素32(IL-32)ELISA试剂盒 15.6-1000 pg/mL
PCSK9 / NARC1 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
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人过还原酶1(PRDX1)ELISA试剂盒 15.6-1000 pg/mL
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CD31 / PECAM1 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
人激肽释放酶8(KLK-8)ELISA试剂盒 0.78-50 ng/mL
ELISA Kit for Human ATP-binding cassette sub-family A member 7 1.56-100 mIU/mL
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达莫司汀 Bendamustine HCl 3543--7 质量规格:纯度> 98%
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司坦唑醇(标准品) Stanozolol 10418-03-8 质量规格:含量测定
CollagenaseⅡ 胶原酶Ⅱ 1mg 支
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曲安西龙(标准品) Triamcinolone 124-94-7 质量规格:含量测定
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V294.PART II,Chapter 4 细胞迁移实验之Dunn趋化迁移培养皿法及时序显微镜分析法
, the DCC has been used to study neurite outgrowth(12). We have previously used the DCC to elucidate the role of Rho family proteinsin the chemotactic response of BAC1.2F5 macrophages to CSF-1 (13). Wedescribe the use of this chamber to study the response
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