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- 库存:
38
- 英文名:
JC-10
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1mg
产品名称 JC-10线粒体膜电位荧光探针价格
规格: 1mg
别名 线粒体膜电位荧光探针
英文名称 JC-10
分子量~600
储存条件 -20°C干燥避光保存,保质期12个月
外观(性状)Ex(nm)
溶剂DMSO
单位瓶
JC-10是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-10聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-10不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-10为单体,可以产生绿色荧光。
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
1.JC-10线粒体膜电位荧光探针价格具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
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1g 氯化金 Gold(Ⅲ)Chloride 室温密封保存
2 ug pG5-Luc pG5-Luc 低温运输,-20℃保存
SCDLP液体培养基 用于疏水性化妆品样品处理及化妆品和一次性使用卫生用品中细菌的增菌培养。(GB、ISO) 250g
头孢菌素纸片(30ug/片) 英文名称:Cephalosporin strip 产品规格:10片/瓶
JC-10线粒体膜电位荧光探针价格Creatininase-Creatinine Amidohydrolase 肌酐酶 1KU 瓶
δ9(11)-基睾酮 Delta9(11)-Methyltestosterone 1039-17-4 质量规格:进口
Ammonium Persulfate 过铵 25g 瓶
4-叔丁基杯[8]芳烃(>98.0%(HPLC)) 4-tert-Butylcalix[8]arene 68971-82-4 质量规格:>98.0%(HPLC)
N-去基罗红霉素 N-Demethyl Roxithromycin 118267-18-8 质量规格:进口
乙酸镧五水(>99%,BR) Lanthanum (III) acetate, pentahydrate 17-90-4 质量规格:>99%,BR
沙丁醇(标准品) Salbutamol 18559-94-9 质量规格:含量测定
西立伐他汀内酯 Cerivastatin Lactone 145599-86-6 质量规格:进口
聚乙二醇60 PEG 60 25322-68-3 质量规格:分子量5,0~7,0,分子生物学级
Salvianolic acid A 丹酚酸A 96574-01-5 20mg
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 25T 盒
鼠尾草酸(标准品) Carnosic acid 639426 质量规格:HPLC≥98%,标准品
紫丁香酚苷(标准品) Syringin 118-34-3 质量规格:HPLC≥98%,标准品
羟钙(标准品) Calcium dobesilate 20123-80-2 质量规格:含量测定
拉坦前列腺素内半缩 Latanoprost Lactol 3526-28-9 质量规格:进口
离子(F-)标准溶液(5mg/L,溶剂:水) Fluoride standard 16984-48-8 质量规格:5mg/L,溶剂:水
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文献和实验一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体
- 1 Channel 收集的绿色荧光信号,来自 JC- 1 monomer;纵轴示 FL- 2 Channel 收集的红色荧光信号,来自 JC- 1 aggregates。5. C 图细胞群为正常对照,我把细胞群摆在近中央的位置。D 图是 CCCP 处理过的细胞,相对于对照,可见 CCCP 处理的细胞群往右下方发生移动,即红色荧光减弱,绿色荧光增强,这表明 CCCP 处理导致线粒体膜电位下降。6. 如何定量分析:通过 winMDI 2.9 软件可分别得到 FL- 1 channel 和 FL- 2 Channel
染料的浓度,引起假去极化。荧光探针JC-1是一种阳离子型的亲脂性染料,能够自由穿过细胞膜,随细胞膜电位的变化而在膜两侧保持动态平衡。其特点是线粒体膜电位低时浓度低,主要以单体形式存在,488nm激发时最大发射波长为527nm,呈绿色荧光,胞浆相对线粒体为低电位,形成流式图中所有细胞FL1均为阳性;膜电位高时浓度高形成聚集体,488nm激发时的最大发射波长为590nm,红色荧光。活细胞线粒体膜电位高,线粒体内JC-1聚集体的浓度高,红色荧光很强,在流式图上表现为FL1和FL2双阳性,而凋亡细胞则大多
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