Human IL-23 ELISA Kit

碧云天的HumanIL-23 ELISA Kit (Human Interleukin-23 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白细胞介素23酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-23的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为19.2pg/ml，与人的IL-12、IL-12 p35、IL-12 p40 dimer、IL-12 p40 monomer和小鼠的IL-23、IL-12、IL-12 p35等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素23 (Interleukin 23, IL-23)通常以异质二聚体的形式存在，其由p19亚基和p40亚基通过二硫键连接而成，其中p40亚基也是IL-12的组成部分。p19亚基与IL-12的另一组成p35亚基也具有一定的同源性。人p19亚基cDNA编码产生189个氨基酸的前体蛋白其中包括19个氨基酸的信号肽和170个氨基酸的成熟蛋白区。人和小鼠的p19亚基具有70%的氨基酸同源性。IL-23的功能性受体复合物由两部分受体亚基组成，IL-12受体β1亚基(IL-12 Rβ1)和IL-23特异性受体亚基(IL-23 R)。
在受到细菌或病毒感染时，树突状细胞和巨噬细胞就会产生分泌IL-23。IL-23与IL-12虽然具有部分相同的组成亚基，但二者生物学功能并不一致。当发生感染时，IL-23能最·先诱导中性粒细胞在炎症部位的募集，而IL-12则负责刺激产生更多的宿主防御反应和细胞因子应答。IL-12促使Th1型细胞产生，诱导NK细胞分泌IFN-γ，而IL-23则通过诱导IL-17A、IL-17F、IL-6和TNF-α维持T细胞状态。IL-23/IL-17是炎性反应中重要的调节因子，但也可能会加速某些自身免疫疾病的发展，如变态反应性脑脊髓炎、胶原诱导性关节炎、结肠炎和糖尿病等。IL-23还可能会促进与慢性炎症相关的肿瘤生长。在人体内，当机体免疫功能失调时IL-23的水平则会出现上调。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人IL-23的浓度，其原理见图1。人IL-23特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人IL-23会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人IL-23抗体后，生物素化抗人IL-23抗体与人IL-23结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人IL-23浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人IL-23浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PI660-1	人IL-23抗体预包被板	8孔×12条
PI660-2	样品分析缓冲液	5ml
PI660-3	标准品稀释液	10ml
PI660-4	人IL-23标准品	2-4瓶
PI660-5	人IL-23生物素化抗体	10ml
PI660-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PI660-7	洗涤液(20X)	30ml
PI660-8	TMB溶液	10ml
PI660-9	终止液	5ml
PI660-10	封板膜(透明)	2张
PI660-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。