Human CCL19/ MIP-3 ELISA Kit

碧云天的Human CCL19/MIP-3β ELISA Kit (Human Macrophage Inflammatory Protein-3β Enzyme-Linked 
ImmunoSorbent Assay Kit)，即人巨噬细胞炎症蛋白3β酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的CCL19/MIP-3β的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为14.5pg/ml，与人HCC-4、MIP-3等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
巨噬细胞炎症蛋白3β (Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β)，又称CCL19 (Chemokine C-C motif Ligand 19)和ELC (EBI1-Ligand Chemokine)，是一种主要表达在次级淋巴组织中的重要趋化因子。CCL19的cDNA编码产生具有98个氨基酸的前体蛋白，其中包含21个氨基酸的信号肽和77个氨基酸的成熟CCL19肽段。CCL19主要表达在淋巴结和成纤维网状细胞，与CCL21一样都能作用于趋化因子受体7 (CCR7)。CCL19和CCL21具有32%的氨基酸同源性，在结构上，CCL21在C端比CCL19多了32个氨基酸，用于调节CCL21与其它分子相结合。二者与CCR7具有大致相同的亲和力，但会产生不同的作用效果。在动脉粥样硬化、肿瘤、骨骼疾病、哮喘、HIV感染和肺炎等条件下，CCL19的表达会出现一定程度的升高。
尽管CCL19与一些细胞表面受体例如CCRL12 (C-C motif Receptor Like 2)和ACKR4 (Atypical Chemokine Receptor 4)，但其发挥功能主要还是受到CCR7受体的调节。CCR7属于A亚型的G蛋白偶联受体，CCL19与CCR7受体结合后能够促进树突状细胞、T细胞、嗜酸性粒细胞、B细胞、内皮细胞和不同种肿瘤细胞的迁移、活化和存活。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人CCL19/MIP-3β的浓度，其原理见图1。人CCL19/MIP-3β特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人CCL19/MIP-3β会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人CCL19/MIP-3β抗体后，生物素化抗人CCL19/MIP-3β抗体与人CCL19/MIP-3β结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人CCL19/MIP-3β浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人CCL19/MIP-3β浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PC123-1	人CCL19/MIP-3β抗体预包被板	8孔×12条
PC123-2	样品分析缓冲液	5ml
PC123-3	标准品稀释液	10ml
PC123-4	人CCL19/MIP-3β标准品	2-4瓶
PC123-5	人CCL19/MIP-3β生物素化抗体	10ml
PC123-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PC123-7	洗涤液(20X)	30ml
PC123-8	TMB溶液	10ml
PC123-9	终止液	5ml
PC123-10	封板膜(透明)	2张
PC123-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。