Human IL-37 ELISA Kit

碧云天生产的Human IL-37 ELISA Kit (Human IL-37 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白细胞介素-37酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-37的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为30.4pg/ml，与人的IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、IL-18、IL-38均没有交叉反应，与小鼠IL-18BP、IL-36α、IL-36γ、IL-38等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。

白细胞介素(Interleukin)是构成免疫信号通路重要组成部分。白细胞介素-37 (Interleukin 37, IL-37)，即IL-1家族成员7 (IL-1 family member 7, IL-1F7)，也被称为FIL­1-zeta、IL-37、IL­-1H4、IL-1HL或IL­-1RP1，是一种抗炎细胞因子。IL-37基因在人基因组内位于2号染色体的长染色体臂上，在小鼠基因组中尚未发现任何同源基因。IL-37与IL-1家族的其它成员相同，是以前体形式合成的，完全激活需要Caspase 1的切割。Caspase-1切割后的IL-37可以转移到细胞核中，与磷酸化或未磷酸化的Smad3形成复合物，影响炎症细胞因子IL-1β、IFN-γ等的表达。IL-37不仅具有抗炎作用，而且在抗菌反应或抗肿瘤免疫中也发挥重要作用。

IL-37选择性剪接产生5种在分子的N末端区域有缺失的剪接变体IL-37a-e，且所有IL-37变体都缺乏典型的信号肽。其中，IL-37b是最大和研究最多的一种，它共享分布在IL-1家族内的β桶型结构(Beta barrel structure)，分别与成熟的IL-1α、IL-1β和IL1-ra具有大约21%、24%和30%的氨基酸序列同源性。IL-37b在多种组织中均有表达，如肾、骨髓、皮肤、血液、呼吸系统以及泌尿生殖系统等。在外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中，炎症刺激可上调IL-37b的表达。此外，人IL-37b对小鼠有一定的活性。在小鼠体内，过表达IL-37b可抑制小鼠炎症反应并保护小鼠免受结肠炎和LPS诱导的炎症性休克。

IL-37b与IL-18结构相似，都具有两个保守的氨基酸残基(IL-37b的Glu-35和Lys-124分别对应于IL-18的Glu-42和Lys-89)，因此可以与IL-18受体(IL-18R)相互作用。与IL-18相比，IL-37b对IL-18Rα的亲和力要低得多，可结合IL-18Rα，但不产生任何激动或拮抗IL-18的作用。然而，IL-37b可与IL-18的抑制性结合蛋白IL-18BP (IL-18 binding protein)结合，随后与IL-18Rβ形成复合物，并通过它抑制IL-18的活性。

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人IL-37的浓度，其原理见图1。人IL-37特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人IL-37会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人IL-37抗体后，生物素化抗人IL-37抗体与人IL-37结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人IL-37浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中靶蛋白浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图 。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PI652-1	人IL-37抗体预包被板	8孔×12条
PI652-2	样品分析缓冲液	5ml
PI652-3	标准品稀释液	10ml
PI652-4	人IL-37标准品	2-4瓶
PI652-5	人IL-37生物素化抗体	10ml
PI652-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PI652-7	洗涤液(20X)	30ml
PI652-8	TMB溶液	10ml
PI652-9	终止液	5ml
PI652-10	封板膜(透明)	2张
PI652-11	封板膜(白色)	2张
—	说明书	1份

保存条件：

标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效，试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。

注意事项：

由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。

洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。

为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。

TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。

加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。

由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。

充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。

本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。

洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。

检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。

加样过程中须避免气泡的产生。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。