Human MSP ELISA Kit

碧云天的Human MSP ELISA Kit (Human Macrophage Stimulating Protein Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人巨噬细胞刺激蛋白酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的MSP的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为96pg/ml，与人的HGF、MSP-a、MSP-β、小鼠MSP等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
巨噬细胞刺激蛋白(Macrophage Stimulating Protein, MSP)，又称为肝细胞生长因子样蛋白(HGF-like Protein)，属于生长因子HGF家族。MSP包含一个PAN/APPLE样区域、四个三环结构域和一个不具有酶活性的蛋白酶S1域。人MSP与小鼠MSP具有79%的氨基酸同源性。MSP主要由肝细胞以无活性的前体蛋白形式分泌，在组织受损时，游离的pro-MSP经酶切作用得到具有生物活性的异质二聚体，该二聚体包含分子量在45-62kDa的α链和分子量在25-35kDa的β链，二者之间由二硫键连接。在急性肾衰竭以及类肉瘤状和支气管扩张患者中，血清MSP水平会出现升高。
MSP或单独的β链都能以较高的亲和力与酪氨酸激酶受体MSP R/Ron结合，但只有MSP能够引发信号传递。MSP R主要表达在巨噬细胞以及皮肤、肺、消化道和女性生殖系统上皮细胞中。分泌型MSP R同样也能够与MSP结合，但会抑制MSP R依赖的信号传递。在多种肿瘤中，MSP R表达会出现上调，MSP R的激活也会有利于肿瘤的转移。
MSP对巨噬细胞介导的炎症反应具有两方面的影响。MSP能够增强巨噬细胞迁移、呼吸爆发和对细菌感染物的吞噬作用。反之，MSP也能抑制在IPS或IFN诱导下巨噬细胞和类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞炎症调节因子的产生。MSP能够促进角质细胞、肾小管上皮细胞和肾小球系膜细胞的增殖，增强破骨细胞介导的骨重吸收。MSP能够抑制早期髓系造血祖细胞的分化和增殖。MSP还能作为一种神经元营养因子，促进神经元细胞存活和神经突触延伸。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人MSP的浓度，其原理见图1。人MSP特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人MSP会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人MSP抗体后，生物素化抗人MSP抗体与人MSP结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人MSP浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人MSP浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PM745-1	人MSP抗体预包被板	8孔×12条
PM745-2	标准品稀释液(5X)	20ml
PM745-3	人MSP标准品	2-4瓶
PM745-4	人MSP生物素化抗体	10ml
PM745-5	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PM745-6	洗涤液(20X)	30ml
PM745-7	TMB溶液	10ml
PM745-8	终止液	5ml
PM745-9	封板膜(透明)	2张
PM745-10	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。