高尔基体红色荧光探针规格

实验报告：
一、高尔基体红色荧光探针规格分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：高尔基体红色荧光探针规格
英文名称：Golgi Body Tracker Red
产品规格：1mg
发货周期：1～3天
本探针可以用于活细胞高尔基体特异性荧光染色。
本探针为采用MolecularProbes公司的BODIPYTR进行了荧光标记的C5-ceramide。Ceramide或其类似物可以选择性地和高尔基体结合，因此荧光标记的ceramide可以用作高尔基体特异性的荧光探针。本探针可以用于活细胞的高尔基体荧光标记，但不适合用于固定细胞的标记。
本探针呈红色荧光，检测时的最大激发波长为589nm，最大发射波长为617nm。提供了本探针稀释液，使本探针的使用更加便捷。
按照1100的比例稀释，可以配制3ml探针工作液；按照1200的比例稀释，可以配制6ml探针工作液。
储存条件-20℃避光，有效期6个月。
注意事项：
      尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
 1,4-二异2′-脱氧鸟苷-5′-三四盐/dGTP，4Na
 环-3-酯盐盐2′-脱氧鸟苷-5′-三三盐/三脱氧鸟苷盐/2-脱氧鸟嘌呤核苷-5-三/脱氧鸟苷三三/dGTP，3Na
 1,3,4,6-四-O-酰-2-脱氧-2-二酰亚-β-D-喃葡萄糖2′-脱氧鸟苷-5′-二三盐/dGDP
 啉盐盐2′-脱氧腺苷-5′-单二/脱氧腺苷单二/脱氧腺苷二/dAMP，2Na
 硬脂钴2′-脱氧腺苷-5′-单/脱氧腺苷单/脱氧腺苷/dAMP
 镝(III) 水合物5-腺苷二二盐/5-二腺苷二盐/焦腺苷/ADP盐/5-ADP，Na2
 铕(III)十水合物, REacton5-腺苷一二盐/腺苷-5′-单二/5´-腺苷二/5-腺嘌呤核苷二盐/5-腺嘌呤核甙二盐/5-腺苷二盐/单腺苷二/一腺苷二/5-AMP，2Na
 异己酯三十醇/1-三十醇/蜂花醇/正三十醇/三十醇/Triacontanol
 2-噻吩多效唑/1-对-2-(1,2,4-三唑-1-)-4,4-二-3-醇/(2RS,3RS)-1-(4-)-4,4-二-2-(1H-1,2,4-三唑-1-)-3-醇/Paclobutrazol/PP333
 环萘啶羧3-吲哚/吲哚/4-(吲哚-3-)/3-吲哚/吲哚-3-/茚/IBA/IUPAC
高尔基体红色荧光探针规格4'正(>95.0%(GC))英文名(EN)Di(propylene glycol) methyl ether, mix...特价促销  规格(SP)100ML
4正(>98.0%(GC))英文名(EN)Diphenyl sulfide,98%特价促销  规格(SP)25G
5 羧荧光素二；5CFDA英文名(EN)Phenyl propargyl ether,≥90%特价促销  规格(SP)1G
5(2)水合物(>98.0%(HPLC))英文名(EN)4Iodoanisole,98%特价促销  规格(SP)25G
5(4羰)0,15,2三卟吩(>90.0%(HPLC))英文名(EN)4Iodophenetole,特价促销  规格(SP)5G
5(6)FAM, SE; 5(6)羧荧光素琥珀亚英文名(EN)βBromophenetole,98%特价促销  规格(SP)5G
5(6)ROX ;5(6)羧X罗丹明盐盐英文名(EN)4(Trifluoromethoxy)iodobenzene,特价促销  规格(SP)1G
5(6)荧光素英文名(EN)Benzo5crown,98%特价促销  规格(SP)1G
5(6)羧荧光素二英文名(EN)3Bromoanisole,≥98%特价促销  规格(SP)25G
5,10二,10二吩嗪(>98.0%(GC)(N))英文名(EN)1Bromo,4dimethoxybenzene,特价促销  规格(SP)5G
5,5二,3环二英文名(EN)3tertButylhydroxyanisole,特价促销  规格(SP)25G
5,5'代双水杨(>98.0%(GC)(T))英文名(EN)Tergitol?特价促销  规格(SP)100ML
5,6,11,12四并四(升华提)英文名(EN)Tetraethylene glycol dimethyl ether,≥...特价促销  规格(SP)100ML
5,6FAM；5(6)羧荧光素英文名(EN)secButyl ether,96%特价促销  规格(SP)5ML
5,6二,10菲啉(>98.0%(T))英文名(EN)4Methylanisole,特价促销  规格(SP)25ML
5,6二茚英文名(EN)Triethylene glycol dimethyl ether,特价促销  规格(SP)100ML
5,6二溴,1,3并噻二唑(>98.0%(GC))英文名(EN)Tri(ethylene glycol) monoethyl ether,特价促销  规格(SP)25ML
5,6环3顺式视黄英文名(EN)Decabromodiphenyl ether,98%特价促销  规格(SP)100G
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。