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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
46
- 英文名：
Helly Fixative Solution
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250mL
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：Helly固定液哪家好
英文名称：Helly Fixative Solution
产品规格：250mL
发货周期：1～3天
Helly固定液是由Zenker固定液改进而来的混合型固定液(把其中的乙酸换成甲醛)。该固定液是白细胞颗粒的优良固定剂，因此对白细胞或造血器官如骨髓，脾脏及肝脏等组织的固定，均可采用Helly固定液固定。
产品特点
1．Helly固定液是骨髓、脾、肝等造血器官的良好固定剂。
2．此固定液亦可保存线粒体，染色前需用去汞。
3．固定时间一般需要10-12小时。
产品组成
成分
溶液A
溶液B
说明书
储存条件常温运输和保存，有效期一年。
使用方法
1．配制适量体积的Helly固定液，按照201的比例将溶液A和溶液B混合，搅拌均匀，所得溶液即为Helly固定液。因溶液B加入到溶液A中24小时后即生成沉淀而失效，所以Helly固定液需要即配即用。
2．标本修块，置入Helly固定液内固定12～24小时(根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异)。
3．固定后，用流水冲洗12小时，常规方法脱水、透明。
4．对于用汞固定或含有汞混合固定液的切片，切片脱蜡后需脱汞(浸入5%酒精10秒)，脱(5%硫代硫酸钠)，然后流水冲洗，染色。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
Helly固定液哪家好待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
大鼠脂蛋白脂酶LPL定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠抗增殖细胞核抗原抗体PCNA定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠酶Methylase定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠E选择素ESelectin/CD62E定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠组织蛋白去酰酶HD定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠卵泡抑素FS定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠水通道蛋白1（AQP1)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒ELISA Kit Rat Aquaporin1 ELISA Kit
大鼠水通道蛋白0（AQP0)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Aquaporin0 ELISA Kit
大鼠水通道蛋白2(AQP2)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Aquaporin2 ELISA Kit
大鼠状腺球蛋白(TG)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒ELISA试剂盒 Rat Thyroglobulin ELISA Kit
大鼠抑制素A（INH A)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Inhibin A ELISA Kit
大鼠绒膜促性腺激素β(βHCG)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat βHCG ELISA Kit
大鼠性激素结合球蛋白（SHBG)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat SHBG ELISA Kit
Helly固定液哪家好 紧密连接蛋白1抗体 IL-23 ELISA Kit 白介素23(IL-23)ELISA试剂盒
光甘草定 订购|咨询 规格 20mg
转录调节子C/EBP α 抗体 IL-22 ELISA Kit 白介素22(IL-22)ELISA试剂盒
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化钙介质素抗体 IL-2 ELISA Kit 白介素2(IL-2)ELISA试剂盒
异鼠李素-3-O-半糖苷 订购|咨询 规格 10mg
核黄素转运蛋白2抗体 IL-21 ELISA Kit 白介素21(IL-21)ELISA试剂盒
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畸胎瘤衍化生长子抗体 IL1Ra ELISA Kit 白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒
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细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：Helly固定液哪家好
英文名称：Helly Fixative Solution
产品规格：250mL
发货周期：1～3天
Helly固定液是由Zenker固定液改进而来的混合型固定液(把其中的乙酸换成甲醛)。该固定液是白细胞颗粒的优良固定剂，因此对白细胞或造血器官如骨髓，脾脏及肝脏等组织的固定，均可采用Helly固定液固定。
产品特点
1．Helly固定液是骨髓、脾、肝等造血器官的良好固定剂。
2．此固定液亦可保存线粒体，染色前需用去汞。
3．固定时间一般需要10-12小时。
产品组成
成分
溶液A
溶液B
说明书
储存条件常温运输和保存，有效期一年。
使用方法
1．配制适量体积的Helly固定液，按照201的比例将溶液A和溶液B混合，搅拌均匀，所得溶液即为Helly固定液。因溶液B加入到溶液A中24小时后即生成沉淀而失效，所以Helly固定液需要即配即用。
2．标本修块，置入Helly固定液内固定12～24小时(根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异)。
3．固定后，用流水冲洗12小时，常规方法脱水、透明。
4．对于用汞固定或含有汞混合固定液的切片，切片脱蜡后需脱汞(浸入5%酒精10秒)，脱(5%硫代硫酸钠)，然后流水冲洗，染色。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
Helly固定液哪家好待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
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产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
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细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验相关实验
或终止内源性或外源性细胞内分解酶的反应，防止组织细胞自溶，更是为了保存组织或细胞内的抗原性，使抗原不失活，不发生弥散。不同的抗原对固定液耐受程度不同，因而要选择合适的固定剂。 现在常用的固定剂有中性甲醛液，4% 多聚甲醛-磷酸盐缓冲液。有些固定剂对特殊组织有更好效果，如苦味酸对于头皮、指甲固定有软化效果，Helly 固定液对于胰岛和垂体效果较好，PLP 固定液对于含糖组织抗原保存更好。 脱水、石蜡包埋和制片 脱水用梯度乙醇(由低到高)充分脱水，对于一些易脆的组织（如肝、脾等）应减少高浓度酒精里
+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3 实 验 用 品 一、器材 显微镜20台、立式染色缸80个、水浴锅1台。 二、材料 香柏油5瓶，擦镜纸5本，镊子5把，盖玻片20片，用carnoy"s固定液固定的肝脏和精巢切片20片。 三、试剂 1. schiff氏试剂 将0.5g碱性品红置入三角烧瓶内沸腾的蒸馏水中，时时摇动玻璃瓶，煮沸5min使之充分溶解，冷却至50℃时过滤，加入10ml 1mol/L HCl，冷至25℃时，加入
机制如下图所示。 2HCl+Na 2 S 2 O 5 →2NaCl+SO 2 +H 2 SO 3 实 验 用 品 一、器材 显微镜20台、立式染色缸80个、水浴锅1台。 二、材料 香柏油5瓶，擦镜纸5本，镊子5把，盖玻片20片，用carnoy"s固定液固定的肝脏和精巢切片20片。
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