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上海邦景
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低温冷藏
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R:10ml×5
产品名称:铜测定试剂盒(络合比色法)图片
英文名称:Copper Assay Kit
产品规格:R:10ml×5
发货周期:1~3天
检测指标:铜;Cu
本试剂盒用于血清、血浆中铜离子(Cu)的体外定量测定。在PH5.0的缓冲液中,Cu2+从铜蓝蛋白解离,与络合剂3,5-二溴-PAESA反应,产生紫红色络合物,在一定范围内吸光率(A)与浓度成正比。
铜是人体健康不可缺少的微量营养素,对于血液、中枢神经和免疫系统,头发、皮肤和骨骼组织以及脑子和肝、心等内脏的发育和功能有重要影响。铜对血红蛋白的形成起活化作用,促进铁的吸收和利用,
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
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Latanoprost Lactol (10 mg) (3aR,4R,5R,6aS)hexahydro4[(3R3hydroxy5phenylpentyl]2Hcyclopenta[b]furan2,5diol; Latanoprost Lactol
抗生素AM2 Staurosporine
AG6 (25 mg) 2[(3hydroxy4nitrophenyl)methylene]propanedinitrile; Tyrphostin AG6; AG6
LY99 (1 mg) Galunisertib; 4[5,6dihydro2(6methyl2pyridinyl)4Hpyrrolo[1,2b]pyrazol3yl]6quinolinecarboxamide
TBB (10 mg) 4,5,6,7tetrabromo1Hbenzotriazole; NSC 2334|Tetrabromobenzotriazole; TBB
Z)Eicosenoic Acid (100 mg) Z)Eicosenoic Acid, (Z)eicosanoic acid
DEAE葡聚糖凝胶A505KU
基乙基纤维素 AE11NA
1H,3H奈并[1,8CD]1,3二酮,英文名或英文缩写:1,8Naphthalic anhydride,级别:AR,90%,规格:25克
间甲氧基 3Methoxy,≥99% 3100 5G 通用试剂
醋醋镧 LcNTHcNUM cCqTcTq HYDRcTq 1004
HotstartTaq酶10克RT
1094乙酯etxyl ForMate; etxyl ester
(1S,2S)1,2Dipxenyletxylenediamine(1S,2S)()1,2二本基乙二安100克BR,98.5%
尼莫地平 Nimodipine (HPLC,≥98%) 6605 20MG 通用试剂
D亮安醋;D柏安醋;(R)2安基4基务醋 DLqucinq 1
3%NaCl葡萄糖(产气)生化鉴定管 规格: 20支/盒 用途: 用于鉴别耐的弧菌利用糖源的能力。(鉴定副溶血性弧菌)
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3%NaCl乳糖生化鉴定管 规格: 20支/盒 用途: 用于弧菌的耐盐试验。
铜测定试剂盒(络合比色法)图片0酸盐葡萄糖胨水培养基250g用于甲基红试验
胰酪胨大豆羊血琼脂基础(TSSB) 250(g) incubation media 胰酪胨大豆羊血琼脂基础(TSSB) 250(g)
尿素琼脂培养基基础 Urease Agar Base 250克 细菌脲酶检测,肠杆菌鉴别
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文献和实验的实验包括外泌体分离、透射电镜(TEM)、纳米颗粒检测(NTA)、BCA、WB。 (二)实验结果如下: 外泌体分离方法:此处步骤比较长,内容篇幅有限,暂且省略步骤,如有需要,可在微信公众号下面留言。 透射电镜拍摄:先制片,再拍摄。制片是先将外泌体固定在铜网上,再用 2% 醋酸双氧铀染色液染色,随后放于灯下烤 10 min,再拍照。 从上面的图片中可以看出,超离法相比较两种试剂盒的分离效果,纯度较高,电镜图片更清晰。 纳米颗粒大小检测:将外泌体样本进行稀释并检测,仪器自动出
色,或核呈分叶状,边集的Hoechst着色的为调亡细胞。我最近在作的试验就是用的这种方法,附上一张我染的PC12细胞的图片,请大家指教。更精确的定量可以通过流式细胞仪来检测。用PI和Hoechst33342双标鉴别调亡、坏死,这种方法简便易行,结果比较可靠。 2、PI和Calcein-Am双标: Calcein-AM 是一种绿色荧光标记物,可显示胞浆,为膜通透性的荧光染料。Calcein-AM 一旦进入胞内,便可被内源性酯酶水解成绿色荧光物质calcein, 并保留在胞浆中。细胞
用戊二醛或碳化二亚胺作为交联剂通过功能基团-NH2、-COOH等将半抗原结合到载体上。结合比例为5kDa结合5~25个分子的小肽。 (三)抗体 (antibody, Ab) 1、抗体的概念: • 机体受到抗原刺激后,由浆细胞合成并分泌出一类具有与抗原发生特异性结合的球蛋白,被称为抗体。 – 抗体主要存在于血清内; – 抗体都是免疫球蛋白,但免疫球蛋白并不一定都是抗体。 – 免疫球蛋白根据重链的结构及抗原特异性不同分为五种,既IgG、 IgD、IgE、 IgA、IgM
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