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- 2025年07月12日
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34
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250mL
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：PLP固定液(Nakane-McLean固定液)说明
英文名称：Periodate-Lysine-Paraformaldehyde Fixative Solution
产品规格：250mL
发货周期：1～3天
PLP固定液即过钠-赖氨酸-固定液，又可称为Nakane-McLean固定液。该固定液的作用机制是借助于过氧化组织中的糖类形成醛基，通过赖氨酸的双价氨基与醛基结合，从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构成，抗原决定簇位于蛋白部分，故该固定液有选择性地使糖类固定，这样既稳定了抗原，又不影响其在组织中的位置关系。
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
注意事项：
PLP固定液(Nakane-McLean固定液)说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
乙酰水杨酸100克
811硼试剂Solvent Violet
化亚甲基，英文名或英文缩写：MDN，级别：CP，98%，规格：10克
2安基异丁醋;DL2安基异丁醋;2安基异酪醋;DL2基炳安醋;DL2安基2基炳醋 2cMinoisobutyric ccid;DL2cMinoisobutcnoic ccid;DL2cMinoisobutyric ccid;DL2Mqthylclcninq;DL2cMino2Mqthyl propcnoic ccid 62
3硝基本酚，英文名或英文缩写：3nitnopxenol，级别：BR，98%，规格：5克
D，E中和肉汤250克RT
TrypanBlue 5g/10g/25g/100g原装 Sigma T61
碱性嶙酸酶shēng huà shì jì容量：100克
4羌基香豆速;4羌基1本并2同 4xy7noxycouMcrin;4xy7noxy1bqnzopyrcn2onq;Bqnzotqtronic ccid;βxy7noxyocouMcric lcctonq 106
磺胺shēng huà shì jì容量：100克
十七酸20毫升
100268五录化0(*)(XZ) pentachloride
二钠10克
2,2'二羟基 2,2'Dihydroxybiphenyl,99% 06297 25G 通用试剂
花宝5号/NPK 优质级 50克 国产/进口
山羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat free thyroxine (FT4) ELISA Kit 大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒
HumanHepatitisGvirusIgG,HGV-IgGELISAKit 人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA试剂盒人促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒规
PLP固定液(Nakane-McLean固定液)说明人α干扰素-2b(IFN-α2b)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子白介素3(IL-3)免疫试剂盒 Rabbit Ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit
特异性蛋白B(PSPB)ELISA试剂盒 ，英文名： PSPB ELISA Kit
PorcineansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISA试剂盒猪转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HumanaibodytogroupAseptococcalpoly
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：PLP固定液(Nakane-McLean固定液)说明
英文名称：Periodate-Lysine-Paraformaldehyde Fixative Solution
产品规格：250mL
发货周期：1～3天
PLP固定液即过钠-赖氨酸-固定液，又可称为Nakane-McLean固定液。该固定液的作用机制是借助于过氧化组织中的糖类形成醛基，通过赖氨酸的双价氨基与醛基结合，从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构成，抗原决定簇位于蛋白部分，故该固定液有选择性地使糖类固定，这样既稳定了抗原，又不影响其在组织中的位置关系。
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
注意事项：
PLP固定液(Nakane-McLean固定液)说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
乙酰水杨酸100克
811硼试剂Solvent Violet
化亚甲基，英文名或英文缩写：MDN，级别：CP，98%，规格：10克
2安基异丁醋;DL2安基异丁醋;2安基异酪醋;DL2基炳安醋;DL2安基2基炳醋 2cMinoisobutyric ccid;DL2cMinoisobutcnoic ccid;DL2cMinoisobutyric ccid;DL2Mqthylclcninq;DL2cMino2Mqthyl propcnoic ccid 62
3硝基本酚，英文名或英文缩写：3nitnopxenol，级别：BR，98%，规格：5克
D，E中和肉汤250克RT
TrypanBlue 5g/10g/25g/100g原装 Sigma T61
碱性嶙酸酶shēng huà shì jì容量：100克
4羌基香豆速;4羌基1本并2同 4xy7noxycouMcrin;4xy7noxy1bqnzopyrcn2onq;Bqnzotqtronic ccid;βxy7noxyocouMcric lcctonq 106
磺胺shēng huà shì jì容量：100克
十七酸20毫升
100268五录化0(*)(XZ) pentachloride
二钠10克
2,2'二羟基 2,2'Dihydroxybiphenyl,99% 06297 25G 通用试剂
花宝5号/NPK 优质级 50克 国产/进口
山羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat free thyroxine (FT4) ELISA Kit 大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒
HumanHepatitisGvirusIgG,HGV-IgGELISAKit 人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA试剂盒人促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒规
PLP固定液(Nakane-McLean固定液)说明人α干扰素-2b(IFN-α2b)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子白介素3(IL-3)免疫试剂盒 Rabbit Ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit
特异性蛋白B(PSPB)ELISA试剂盒 ，英文名： PSPB ELISA Kit
PorcineansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISA试剂盒猪转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HumanaibodytogroupAseptococcalpoly
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
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文献和实验相关实验
【求助】免疫细胞化学固定液的选择参与者：swift11求助各位大虾：我是新手上路，准备做免疫细胞化学。我要检测细胞内的一种蛋白质，用什么固定也比较好？参与者：琴心剑胆4%多聚甲醛参与者：docqian用4% PFA固定一般比较好。此外也可以用丙酮，或者甲醇固定。需要说明的是，固定对有些抗体很重要，需要选择特定的固定，一般时候，抗体的说明会说明。例如，我染色细胞线粒体的时候（oxphos complex III），用4%PFA没有结果，但是我用甲醇固定以后，就染的挺漂亮了。祝好运！参与
―赖氨酸―多聚甲醛(periodate-lysine-paraformaldehyde，PLP)液和2％多聚甲醛―0．5％戊二醛混合液。在包埋前染色中，PLP较为常用，该固定液较适用于含糖类丰富的组织，对超微结构及许多抗原活性保存较好。因为PLP中的过碘酸能氧化糖类，使其中的羟基转变为醛基，赖氨酸的双价氨基与醛基结合从而把抗原交联起来。因组织抗原绝大多数含蛋白质和糖类。而抗原表位一般位于蛋白部分。PLP能选择性地使糖类交联，这样既稳定了抗原，又不影响抗原表位与抗体的结合。加入低浓度的多聚甲醛则能稳定
，为实验室常用固定剂之一。我们在应用中，常采用2.5%的多聚甲醛和30%的饱和苦味酸，以增加其对组织的穿透力和固定效果，保存更多的组织抗原。固定时间为6～18 h。 5、PLP液 PLP液即过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液（Periodate-Lysine-paraform-alde－hyde fixative） 试剂：过碘酸钠、赖氨酸盐酸盐（或盐酸赖氨酸）、多聚甲醛、蒸馏水。 配制方法： （1）贮存液A（0.1 mol/L赖氨酸-0.5mol/L Na3PO4，pH7.4）：称取赖氨酸
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