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- 2025年07月13日
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33
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100T
中文名称：细胞凋亡检测试剂盒V(POD)价格
英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
保存条件-20℃冰冻保存一年。
工作原理
在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡，其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚，时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活
，细胞自身的染色质或DNA被切割，出现单链或双链缺口，并产生与DNA断点数目相同的3’-OH末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(TerminaldeoxynucleotidylTransferase)可以将标记的
dUTP(DIG-dUTP)标记至3’-OH末端，DIG-dUTP结合在DNA断点部位，可以通过生物标记的抗抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后，再结合链酶亲和素-过氧化物酶(SABC)，然后加入显色底物
DAB予以显示。凋亡的细包核呈黄色，从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。
试剂盒内容
1.标记缓冲液(LabelingBuffer)5ml
2.末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)100μl
3.DIG-dUTP(×20)100μl
4.封闭液(BlockingReagent)20ml
5.生物素化抗抗体(×100)100μl
6.SABC(×100)100μl
7.ProteinaseK(×200)250μl
8．抗体稀释液20ml
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．细胞凋亡检测试剂盒V(POD)价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
2-溴-3--6-啶多聚半乳糖/果胶/远志/聚半乳糖/Polygalacturonic acid
6,6'-二溴-N,N'-(2-辛十二)-异靛蓝多聚半乳糖/多聚果胶/Polygalacturonic acid sodium salt
3-酰-3-果胶/粘胶质/植物性粘质/Pectin
2-(氧)二赤藓糖醇/二代赤藓糖醇/ 1，4-二代赤藓糖醇/二赤藓醇/二赤藓糖醇/二代赤四醇/1,4-二巯-2,3-二醇/二代赤藓醇/DTE
4-苄吗啉-2-腈二代苏糖醇/1,4-二苏糖醇/DL-1,4-二代苏糖醇/1,4-二巯苏糖醇/1,4-二巯-DL-苏糖醇/DTT
2--3,5-二DL-苹果/苹果/DL-羟琥珀/DL-羟二/DL-Malic acid
三异酯L-苹果/L-羟琥珀/L-羟二/(S)-羟二/L-醇二/L-Malic acid
5-溴-2-苄氧-6-啶DL-乳/乳/2-羟/α-羟/(±)-2-羟/DL-α-羟/DL-Lactic acid
乌利司他L-乳/L-2-羟/(S)-(+)-2-羟/L-(+)-Lactic acid
1-溴-4-正十二肌醇/六醇/肌糖/环六醇/Inositol
细胞凋亡检测试剂盒V(POD)价格聚二12000标准品 Polyethylene Glycol 12000 CAS25322683
聚二10000标准品 Polyethylene Glycol 10000 CAS25322683
聚二1000标准品 Polyethylene Glycol 1000 CAS25322683
聚二硅标准品 Polydimethylsiloxane CAS9016006
聚葡萄糖标准品 Polydextrose CAS68424044
泊洛沙姆固体标准品 Poloxamer Solid CAS2594628
泊洛沙姆标准品 Poloxamer Liquid CAS2594628
泊洛沙姆标准品 Poloxalene CAS2594628
波拉克林标准品 Polacrilin Potassium CAS65405552
聚克利树脂标准品 Polacrilex Resin CAS
普卡霉素标准品 Plicamycin CAS18378897
罗昔康标准品 Piroxicam CAS36322904
罗克相关物质B标准品 Piroctone Related Compound B CAS50650754
罗克相关物质A标准品 Piroctone Related Compound A CAS
罗克铵标准品 Piroctone Olamine CAS68890664
盐二 进口、国产 Dimethylaminehydrochloride 含量BR，98%
盐脲 进口、国产 Semicarbazidehydrochloride 含量实习级，98%
盐 进口、国产 Pyridinehydrochloride 含量88%
盐哆辛 进口、国产 VB6 含量80%
盐苄脒 进口、国产 Benzamidinehydrochloride 含量CP
盐酯 进口、国产 DLAlanineethylesterhydrochloride 含量99%
盐大观霉素 进口、国产 SpectinomycinHCl 含量14400～97400，末,6条带
盐地霉素 进口、国产 Oxytetracyclinehydrochloride 含量BR，95%
盐对二 进口、国产 1，4Phenylenediaminedihydrochloride 含量超，99%
盐对 进口、国产 4Methylanilinehydrochloride 含量蛋白生物学级，10%
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
保存条件-20℃冰冻保存一年。
工作原理
在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡，其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚，时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活
，细胞自身的染色质或DNA被切割，出现单链或双链缺口，并产生与DNA断点数目相同的3’-OH末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(TerminaldeoxynucleotidylTransferase)可以将标记的
dUTP(DIG-dUTP)标记至3’-OH末端，DIG-dUTP结合在DNA断点部位，可以通过生物标记的抗抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后，再结合链酶亲和素-过氧化物酶(SABC)，然后加入显色底物
DAB予以显示。凋亡的细包核呈黄色，从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。
试剂盒内容
1.标记缓冲液(LabelingBuffer)5ml
2.末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)100μl
3.DIG-dUTP(×20)100μl
4.封闭液(BlockingReagent)20ml
5.生物素化抗抗体(×100)100μl
6.SABC(×100)100μl
7.ProteinaseK(×200)250μl
8．抗体稀释液20ml
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．细胞凋亡检测试剂盒V(POD)价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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6,6'-二溴-N,N'-(2-辛十二)-异靛蓝多聚半乳糖/多聚果胶/Polygalacturonic acid sodium salt
3-酰-3-果胶/粘胶质/植物性粘质/Pectin
2-(氧)二赤藓糖醇/二代赤藓糖醇/ 1，4-二代赤藓糖醇/二赤藓醇/二赤藓糖醇/二代赤四醇/1,4-二巯-2,3-二醇/二代赤藓醇/DTE
4-苄吗啉-2-腈二代苏糖醇/1,4-二苏糖醇/DL-1,4-二代苏糖醇/1,4-二巯苏糖醇/1,4-二巯-DL-苏糖醇/DTT
2--3,5-二DL-苹果/苹果/DL-羟琥珀/DL-羟二/DL-Malic acid
三异酯L-苹果/L-羟琥珀/L-羟二/(S)-羟二/L-醇二/L-Malic acid
5-溴-2-苄氧-6-啶DL-乳/乳/2-羟/α-羟/(±)-2-羟/DL-α-羟/DL-Lactic acid
乌利司他L-乳/L-2-羟/(S)-(+)-2-羟/L-(+)-Lactic acid
1-溴-4-正十二肌醇/六醇/肌糖/环六醇/Inositol
细胞凋亡检测试剂盒V(POD)价格聚二12000标准品 Polyethylene Glycol 12000 CAS25322683
聚二10000标准品 Polyethylene Glycol 10000 CAS25322683
聚二1000标准品 Polyethylene Glycol 1000 CAS25322683
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盐苄脒 进口、国产 Benzamidinehydrochloride 含量CP
盐酯 进口、国产 DLAlanineethylesterhydrochloride 含量99%
盐大观霉素 进口、国产 SpectinomycinHCl 含量14400～97400，末,6条带
盐地霉素 进口、国产 Oxytetracyclinehydrochloride 含量BR，95%
盐对二 进口、国产 1，4Phenylenediaminedihydrochloride 含量超，99%
盐对 进口、国产 4Methylanilinehydrochloride 含量蛋白生物学级，10%
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型，绿色荧光)为例) TUNEL检测：使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min，再使用二甲苯脱蜡2次，每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
（一） 原理 细胞凋亡的发生，是由于钙- 镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA , 产生180bp ～200bp 或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A 、H2B 、H3 和H4 形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法，应用小鼠抗DNA 和抗组蛋白的单克隆抗体，与核小体片段形成夹心结构，可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。 （二）材料与试剂 1 ．采用Boehringer
-HCL， 0.1% BSA（w/v）， 0.1% Tween 20（v/v） (3) POD封闭液：含0.3% H2 O2 的甲醇液； (4) 链霉亲和素－POD（10mg/ml） (5) 链霉亲和素－荧光素（10mg/ml） (6) DAB底物 【操作方法】 1、蛋白印迹法（western blotting） (1) 准备标本，并经SDS－PAGE分离； (2) 将所分离的蛋白转移至PVDF或NC膜； (3) 用封闭缓冲液封闭非特异性结合位点，室温1小时
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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