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地塞米松溶液(10mM in DMSO)说明书

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  • 上海研生
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  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      Dexamethasone (10mM in DMSO)

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      25mg

    【细胞冻存】
    待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
    中文名称:地塞米松溶液(10mM in DMSO)说明书
    英文名称:Dexamethasone (10mM in DMSO)
    产品规格:25mg

    发货周期:1~3天
    地塞米松(Dexamethasone),一种抗炎糖皮质素,对细胞存活、细胞信号的转导和基因表达具有一系列的影响,如可抑制一氧合酶的诱导作用(IC50=5nM);可通过刺激Na+-K+泵增强大动脉平滑肌细胞阳离子的运输作用;可降低周期蛋白A和Cdk2的活性;抑制骨细胞G1/S的过渡;抑制Rb蛋白的磷酸化作用;诱导人胸腺细胞凋亡发生。

    本品为溶于DMSO的储存液,浓度10mM。一般而言,500-1000nM的地塞米松于37℃作用6h足可诱导凋亡发生。
    储存条件-20℃
    【培养指南】
    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    【复苏的原则】
    产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
    细胞的种类:
    第一种:
    是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种:
    是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    细胞培养操作规程:
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
     反式-3-羟基肉桂酸1,2-二化茚/茚满/2,3-二化茚/Indan

     2,4-二基苄醇米吐尔/对盐/基对/对基盐/对基/4-基盐/4-(基)盐/二(4-羟基-N-)盐/N-基-4-盐/Metol
     4-基酰优巴拉尔/Euparal
     依泽替米贝对称二炔/二基炔/二炔/Diphenylacetylene
     4-羟基四喃屈/1,2-并菲/稠二萘/1,2,5,6-二并萘/并a菲/Chrysene
     对氧酰酰/酰/偶酰/二基二/1,2-二基二/Benzil
     1,4-二-2-阿拉西A/失水甘露糖醇单油酸酯/阿拉塞A/Arlacel A
     4-基-3-三黄凡士林/凡士林/Vaselineoil
     4--4-氧酸酯凡士林/白凡士林/石油脂(I)/Vaselineoil
     3,3-二盐安替比林/安替啉/替比林/1,5-二基-2-基-3-唑啉/非那宗/二基唑/2,3-二基-1-基-3-唑啉-5-/Antipyrine
    地塞米松溶液(10mM in DMSO)说明书DNA PAGE胶回收(30次)  规格HPLC≥98%;10mgThermopsine

    DNA UV防护剂  规格HPLC≥98%; 20mgCoptisine chloride
    胶回收及PCR片段化两用试剂盒(100次)  规格HPLC≥98%; 20mgAstragaloside IV
    一管式DNA胶回收试剂(100次)  规格HPLC≥98%;10mgAstragaloside IV
    一管式DNA胶回收试剂(30次)  规格HPLC≥98%;20mgAstragaloside III
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    PAGE胶长加样枪头  规格HPLC≥98%;20mg7-O-Methylbaicalein 6-Dihydroxy-7-methoxyflavoneNegletein
    酰溶(干型),电泳级  规格HPLC≥98%;20mg6-Hydroxy-7-methoxy-4-phenylcoumarin
    剥离硅  规格HPLC≥98%;20mgCyclovirobuxin D
    操作步骤(仅供参考):
    1、地塞米松溶液(10mM in DMSO)说明书贴壁细胞的消化
    ①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
    ②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
    ③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
    化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
    ④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
    2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。


     

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