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59
- 英文名:
Dexamethasone (10mM in DMSO)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
25mg
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:地塞米松溶液(10mM in DMSO)说明书
英文名称:Dexamethasone (10mM in DMSO)
产品规格:25mg
发货周期:1~3天
地塞米松(Dexamethasone),一种抗炎糖皮质素,对细胞存活、细胞信号的转导和基因表达具有一系列的影响,如可抑制一氧合酶的诱导作用(IC50=5nM);可通过刺激Na+-K+泵增强大动脉平滑肌细胞阳离子的运输作用;可降低周期蛋白A和Cdk2的活性;抑制骨细胞G1/S的过渡;抑制Rb蛋白的磷酸化作用;诱导人胸腺细胞凋亡发生。
本品为溶于DMSO的储存液,浓度10mM。一般而言,500-1000nM的地塞米松于37℃作用6h足可诱导凋亡发生。
储存条件-20℃
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
反式-3-羟基肉桂酸1,2-二化茚/茚满/2,3-二化茚/Indan
2,4-二基苄醇米吐尔/对盐/基对/对基盐/对基/4-基盐/4-(基)盐/二(4-羟基-N-)盐/N-基-4-盐/Metol
4-基酰优巴拉尔/Euparal
依泽替米贝对称二炔/二基炔/二炔/Diphenylacetylene
4-羟基四喃屈/1,2-并菲/稠二萘/1,2,5,6-二并萘/并a菲/Chrysene
对氧酰酰/酰/偶酰/二基二/1,2-二基二/Benzil
1,4-二-2-阿拉西A/失水甘露糖醇单油酸酯/阿拉塞A/Arlacel A
4-基-3-三黄凡士林/凡士林/Vaselineoil
4--4-氧酸酯凡士林/白凡士林/石油脂(I)/Vaselineoil
3,3-二盐安替比林/安替啉/替比林/1,5-二基-2-基-3-唑啉/非那宗/二基唑/2,3-二基-1-基-3-唑啉-5-/Antipyrine
地塞米松溶液(10mM in DMSO)说明书DNA PAGE胶回收(30次) 规格HPLC≥98%;10mgThermopsine
DNA UV防护剂 规格HPLC≥98%; 20mgCoptisine chloride
胶回收及PCR片段化两用试剂盒(100次) 规格HPLC≥98%; 20mgAstragaloside IV
一管式DNA胶回收试剂(100次) 规格HPLC≥98%;10mgAstragaloside IV
一管式DNA胶回收试剂(30次) 规格HPLC≥98%;20mgAstragaloside III
柱式 DNA PAGE 胶回收试剂盒 规格HPLC≥98%;10mgAstragaloside I
柱式DNA胶回收试剂盒(100次) 规格HPLC≥98%;10mgAstragaloside II
柱式DNA胶回收试剂盒(50次) 规格HPLC≥98%;10mgAstragaloside
柱式miRNA PAGE胶回收试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgEngeletin
柱式OLIGO回收试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgBaicalin
核电泳相关产品 规格HPLC≥98%;10mgBaicalin
MOPS,电泳级 规格HPLC≥98%;20mgBaicalein
PAGE胶长加样枪头 规格HPLC≥98%;20mg7-O-Methylbaicalein 6-Dihydroxy-7-methoxyflavoneNegletein
酰溶(干型),电泳级 规格HPLC≥98%;20mg6-Hydroxy-7-methoxy-4-phenylcoumarin
剥离硅 规格HPLC≥98%;20mgCyclovirobuxin D
操作步骤(仅供参考):
1、地塞米松溶液(10mM in DMSO)说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验潭深水静 请教各位园友: 新买的 anisomycin用什么溶液溶解保存。 谢谢! 潭深水静 主要用来刺激p-38,有用生理盐水稀释到终浓度的 但不知道用什么来溶解配母液 yhwangcams 根据sigma的说明,可以用多种溶液配制母液: solubility ethanol: 12 mg/mL solubility H2O: 2 mg/mL
olivial 最近在做细胞内信号转导通路PI-3K-Akt,关于它的抑制剂LY 294002的配制,说明书上写用DMSO,在做实验时设了vehicle(含等量DMSO)组,但发现DMSO对细胞(小胶质细胞)有影响,且DMSO与干预药有协同作用,MTT结果显示DMSO浓度>=0.1%即对细胞造成损伤,而任何浓度DMSO(0.01%~0.1%)都与干预药有协同作用,乙醇的结果亦如此。所以想请教,大家在配LY时是怎么配的?在使用LY时是否遇到了上述问题
在合成黄连素、菸酸肌醇酯、蔗糖脂肪酸多酯和中药萃取生产都已应用。 4、在医疗中的应用 DMSO对许多药物具有溶液性、渗透性、本身具有消炎、止痛,促进血液循环和伤口愈合,并有利尿、销静作用。能增加药物吸收和提高疗效,因此在国外叫做“万能药”。各种药物溶解在DMSO中,不用口服和注射,涂在皮肤上就能渗入体内,开辟了给药新途径。更重要的是提高了病区局部药物含量,降低身体其他 的药物危害。国外在医疗上的研究报道很多,我国由沈阳药学院、北京药物研究所、中国药物检测中心等在60
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