细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)价格

【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)价格
英文名称：
产品规格：20T
发货周期：1～3天
保存条件-20℃冰冻保存一年。
工作原理
在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡，其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚，时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活，细胞自身的染色质或DNA被切割，出现单链或双链缺口，并产生与DNA断点数目相同的3’-OH末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(TerminaldeoxynucleotidylTransferase)可以将标记的dUTP(DIG-dUTP)标记至3’-OH末端，DIG-dUTP结合在DNA断点部位，可以通过生物标记的抗抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后，再结合链酶亲和素-荧光素FITC(SABC-FITC)。FITC在490-495nm激化，在520-530nm发射荧光，呈黄绿色。凋亡的细包核呈黄绿色，从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。
试剂盒内容
1．标记缓冲液(LabelingBuffer)1ml
2．末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)20μl
3．DIG-dUTP(×20)20μl
4．封闭液(BlockingReagent)4ml
5．生物素化抗抗体(×100)20μl
6．SABC-FITC(×100)20μl
7．ProteinaseK(×200)50μl
8．抗体稀释液4ml
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)价格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
 2-正基酰酸酯酸铯/Cesium nitrate
 化铕(II)碳酸铈/碳酸铈(Ⅲ)/碳酸亚铈/水合碳酸铈/水合碳酸铈(III)/Cerium carbonate hydrate
 噻吩-3-醇N,N′-羰基二咪唑/1,1’-羰基二咪唑/羰基咪唑/1,1ˊ-羰酰二咪唑/羰基二咪唑/1,1-羰二咪唑/CDI
 3,5-二-4-聚氧烯月桂醇/3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-十氧杂四十二-1-醇/月桂醇聚-10/C12E10
 2,5-二-3-溴啶聚醇/月桂醇聚-9/单十二基九二醇/C12E9
 1,3-并恶唑-6-羧酸辛烯二醇单正十二基酯/月桂醇聚-8/辛二醇单十二/八甘醇单正十二基/C12E8
 1,3二基盐酸盐九聚二醇单/C10E9
 2-(7-氧基萘-1-基)腈六聚二醇单/C10E6
 1,2,4,5-四溴汉黄芩苷/汉黄芩甙/Wogonoside
 2,2,4,6,7-五基二并-5-酰野黄芩苷/野黄芩甙/灯盏花素/高黄芩苷/高黄芩甙/印黄芩苷/黃芹素/Scutellarin
细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)价格大肠杆菌HB101感受态细胞  规格HPLC≥98%;20mgmiltirone
大肠杆菌JM109感受态细胞  规格HPLC≥98%;20mgNeoliquiritin
大肠杆菌JM110感受态细胞  规格HPLC≥98%;20mgNeokurarinol
大肠杆菌M15感受态细胞  规格HPLC≥98%;20mgNorkurarinone
大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant感受态细胞  规格HPLC≥98%;20mgNeochlorogenic acid
大肠杆菌Origami B(DE3)plysS感受态细胞  规格HPLC≥98%;0.5mlNeomangiferin
大肠杆菌Origami(DE3)感受态细胞  规格HPLC≥98%;100mgNeogambogic acid
大肠杆菌OrigamiB(DE3)感受态细胞  规格HPLC≥98%;50mgMesaconitine
大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞  规格HPLC≥98%;20mgNeoisoliquiritin
大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞  规格HPLC≥98%;10mgArbutin
大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys感受态细胞  规格HPLC≥98%;10mgUrsolic Acid
大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞  规格HPLC≥98%;20mgUrsodeoxycholic Acid
大肠杆菌Rosetta感受态细胞  规格HPLC≥98%;20mgCurcurbitacin IIa
大肠杆菌Stbl3感受态细胞  规格HPLC≥98%;5mgCurcubitacin IIb
大肠杆菌SURE感受态细胞  规格HPLC≥98%;100mgBullatine A
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。