- 询价
- 上海研生
- YSRIBIO-C1206
- 进口
- 2025年07月13日
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 英文名：
TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20T
一、TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)价格分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)价格英文名称：TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)
产品规格：20T
发货周期：1～3天
本试剂盒应用范围广，可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNAladder。
TUNEL(TdTmediateddUTPNickEndLabeling)细胞凋亡检测试剂盒（FITC）可以用来检测组织细胞在凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是在末端脱氧核糖核苷酸转移酶（TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT）的作用下，在基因组DNA断裂时暴露出的3′-羟基（3′-OH）末端掺入FITC-12-dUTP，从而可以用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
本试剂盒对标记反应进行了优化，采用最佳比例的FITC-12-dUTP和未标记dNTP进行3’-OH末端的核苷酸掺入，使得同一个断裂的DNA片段末端可以形成更长的“标记尾巴”。该“标记尾巴”减少了相邻掺入dNTP上标记基团的空间位阻，增加每个断裂片段上的荧光基团数目，降低荧光基团相邻后可能造成的聚集和淬灭，从而提高检测灵敏度，减少非特异性反应。
试剂盒组份
5×EquilibrationBuffer————750μl
FITC-12-dUTPLabelingMix———100μl
RecombinantTdTEnzyme—————20μl
ProteinaseK(2mg/ml)————40μl
DNaseI(1U/μl)———————5μl
10×DNaseIBuffer——————100μl
储存条件-20℃，有效期一年。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
2-基-7-氧代-4,5,6,7-四-1-并噻吩-3-羧酸酯莫能菌酸/莫能星/摩能霉素/莫能霉素/莫能菌素/Monensin sodium
2,3,4-三溴卡莫司汀/卡芥/双亚脲/亚脲/化亚脲/亚脲芥/1,3-双(2-基)-1-亚脲/Carmustine/BCNU
2-溴-3-啶阿米卡星/卡那霉素/Amikacin
2,4-二醇阿米卡星/卡那霉素/阿米卡霉素/O-3-基-3-脱氧-alpha-D-葡喃糖基-(1→6)-O-(6-基-6-脱氧-alpha-D-葡喃糖基-(1→4)-N-(4-基-2-羟基-1-氧基)-2-脱氧-D-链霉盐/Amikacin sulfate salt
2--3-苄醇霉素/Phosphomycin disodium salt
2-氧基-4-啶盐酸克林霉素/克林霉素盐酸盐/盐酸林大霉素/盐酸洁霉素/林可霉素/Clindamycin Hydrochloride
2-溴-3-盐酸洛美沙星/(±)-1-基-6,8-二-1,4-二-7-(3-基-1-嗪基)-4-氧-3-羧酸盐酸盐/Lomefloxacin hydrochloride
3-溴-5-酰水杨酸/阿司匹林/阿斯匹林/邻酸酸/酰基柳酸/柳酸/邻酰基水杨酸/Acetylsalicylic acid
(R)-(+)-2-(4-羟氧基)酸酯盐酸壮观霉素/盐酸大观霉素/奇霉素/奇素/放线壮观霉素/Spectinomycin HCl
2,6-二-5-烟酰酸酯去基盐酸万古霉素/盐酸去万古霉素/Norvoncomycin hydrochloride
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)价格美托尔相关物质D标准品 规格50mg
米平混合物标准品 规格25mg Mirtazapine Resolution Mixture
米托蒽醌标准品(系统适用性) 规格0.3mg
霉酯相关物质A标准品 规格15mg
近红外系统适用性参考标准标准品 规格ea Near IR System Suitability
法相关物质B标准品 规格25mg Nefazodone Related Compound B
非那韦标准品 规格200mg
新橙皮二查尔标准品 规格ea
纽甜相关物质A标准品 规格15mg Neotame Related Compound A
盐去羟基标准品 规格50mg
三脱腺苷盐 进口、国产 dATP，2Na 含量BR，98%
三脱胸苷盐 进口、国产 TTP 含量生物技术级，95%
三代蔗糖 进口、国产 Sucralose 含量高，98%
三铋 进口、国产 BismuthChloride 含量BR
三 进口、国产 Iodinetrichloride 含量CP，90%
三 进口、国产 Chromicchloridehexahydrate 含量AR
三金 进口、国产 Gold(III)chloride 含量97%
三钕 进口、国产 Neodymium(III)chloride 含量超，99.5%
三铈 进口、国产 Cerouschloride 含量试剂级，98%
三铟 进口、国产 Indiumchloride 含量GR，99.8%
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验产品名称：Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒英文名称：Annexin V-FITC & PI Apoptosis Detection Kit产品分类：细胞凋亡检测试剂盒[Apoptosis Assay Kit]产品编号：A0001c检验方法：Apoptosis包 装：20T产品说明：Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒 概述产品说明在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V
示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
膜的外侧。Annexin-V是一种35-36KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白，它对PS具有较高的亲和力。细胞凋亡时，可以和外翻的PS结合，从而可以检测凋亡的细胞。发生死亡的细胞其细胞膜上的PS也外翻，因而也会阳性。因此，常用的凋亡试剂盒除了采用Annexin-V标记之外，还会加一种DNA染料，常用的有PI和7-AAD，由于死亡的细胞膜通透性增高，染料可以进入细胞内和DNA结合，从而可以发荧光，区分出死细胞。下图给出的是在使用FAS单抗诱导前后的检测结果，横坐标是Annexin-V FITC，纵坐标是PI
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
