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58
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
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低温冷藏
- 规格:
1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
英文名称:JAK3-IN-1
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
JAK3-IN-1是一种有效的JAK3抑制剂,IC50值为4.8nM,也能抑制JAK1(IC50=896nM)和JAK2(IC50=1050nM)。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1805787-93-2
纯度:99.16%
分子量:508.02
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
使用方法:
1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
注意事项:
JAK3抑制剂(JAK3-IN-1)说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
硬脂酸钙shēng huà shì jì容量:1克
207001十二烷基二甲基乙基化铵 (EDDAB)Dodecyletxyldimetxylammonium bromide
汽巴蓝F3GA,英文名或英文缩写:Cibacron Blue F3GA,级别:高,规格:5克
2,5二苯 2,5Dichlorofluorobenzene,99% 35 5G 通用试剂
聚酰胺/三号凝聚剂/双酰胺235溶液/PAM/PHⅢ BR,MV>300万 250\1000克 国产/进口
硬酯酸25克
0222S腺苷蛋酸对磺酸盐AdeMetionine Disulfate Tosylate
metxyl 2amino4(4chloropxenyl)5metxyl3thiopxenecarboxylat 3570
2,2,2三乙基酯 2,2,2Trifluoroethyl butyrate,98% 37 25G 通用试剂
N,N二基三基烷基安;二安基三基烷;三基烷基二安 N,NDiqthyltriMqthylsilylcMinq;N,NDiq thyl1,1,1triMqthylsilylcMinq;TriMqthylsilyldiqthylcMinq;(DiqthylcMino)triMqthylsilcnq;TMSDqc 9209
DLlacticacidlitxiumsaltDL乳酸500克分析标准品
624硫清酸铵;硫清化铵AMMoniuM thiocyanate;AMMoniuM sulfocyanide;AMMoniuM rhodanide;Thiocyanic acid aMMoniuM salt
Trypsin(porcinepancreas)胰蛋白酶(猪胰)500克BR,100250u/mg
化偏苯三 Trimellitic anhydride chloride,98% 080 25G 通用试剂
苄青霉素 (常规) Ampicillin sodium salt (.0%100.5%) 523 5G 通用试剂
人蛋白激酶A(PKA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠cAMP反应元件结合蛋白(CREB)免疫试剂盒 Mouse cAMP response eleme binding protein,CREB ELISA Kit
拓朴异构酶Ⅱ(TopoⅡ)ELISA试剂盒 ,英文名: TopoⅡ ELISA Kit
Mouseplateletfactor3,PF3ELISA试剂盒小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Chickenbasicfibroblastgr
JAK3抑制剂(JAK3-IN-1)说明人抗蛋白酶3抗体IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)免疫试剂盒 Mouse maix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit
乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒 ,英文名: ACH ELISA Kit
MouseAndrostenedione,ASDELISA试剂盒小鼠雄烯二同(ASD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
ELISAKitMCP-2/CCL8小鼠单核细胞趋化蛋白2规格:48
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文献和实验transcription. A 50 mM (5 mg/454 µl) solution of JNK Inhibitor II (Cat. No. 420128) in DMSO is also available. Calbiochem的说明书。此抑制剂对3型JNK均有抑制作用,IC50有所区别。宣称对JNK的抑制比对ERK1和p38等的抑制要强300多倍。可是,这个应该是有争议的。作为JNK抑制剂起效快,但是特异性还有待研究。 提高特异性的另外一个选择是TAT JBD
zuoliping 急切求助:因为有在文献查到PIK3/AKT与我要做的一个蛋白的表达有关,我想做这个通路的抑制剂与这个蛋白的表达的关系,看是否有时间和剂量的依赖性。但是抑制剂的说明说对这个剂量的范围很大,有查文献,在不同细胞中取的浓度组都不太一样,我想知道这些不同的浓度组是怎么确定的呢?要做MTT吗?希望大家不吝赐教!不甚感激! happytears 当然要做多次预实验了,做之前你需要大量阅读文献,看别人做过的你这种
dentist昭安 买的信号通路抑制剂(PDTC,LY294002,SB203580),用之前是不是一般都需要做个细胞活力检测的?如台盼蓝或MTT? 做MTT的话,一般是设几个不同的浓度组,作用一定时间(24h?)后检测? 是这样设计的吗? 那不同的抑制剂浓度分组一般选择哪几个浓度呢?是按说明书规定的作用范围在其中选择几个组,还是参考文献?但这方面类似文献看到的好像不是很多,感觉别人一般都不做
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