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- TUNEL染色
- 江苏南京
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
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- 提供商：
BOSGENE
- 服务名称：
TUNEL染色
- 规格：
张
TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。
其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端，并与连接辣根过氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的荧光素抗体特异性结合，后者又与HRP底物DAB反应产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。
实验流程
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文献和实验一、TUNEL法的实验原理 细胞发生凋亡时, 染色体DNA双链或单链断裂产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖
Detection of apoptotic process in situ using immunocytochemical and TUNEL assays
, however, can not provide information regarding the histological localization at single cell level. This can be done by immunocytochemical method (A) or by enzymatic in situ labeling of apoptosis-induced DNA strand breaks (TUNEL) (B). Apoptosis was observed
PROTOCOL: •Deparaffinize and rehydrate slides: 3 x 3´ Xylene 3 x 2´ 100% ethanol 1 x 2´ 95%, 80%, 70% ethanol (each) 1 x 5´ 1x PBS •Microwave antigen retrieval: 4 x 5´ in microwave (600 ml of 10mM NaCitrate, pH 6) Cool 20
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