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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
250g
产品名称:YPD液体培养基价格
说明:新鲜甘露醇氯化钠琼脂平板呈红色不透明凝胶状;使用前把在冰箱冷藏的甘露醇氯化钠琼脂平板置室温10-20分钟后待用。
用途:用于药品、生物制品黄金色葡萄球选择性分离培养。
注意事项:平板超过保质期,干枯和污染均不能使用。
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
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麦芽浸膏肉汤 (CM0057) Oxoid incubation media 麦芽浸膏肉汤 (CM0057) Oxoid
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YPD液体培养基价格MMQ 小鼠垂体瘤细胞
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文献和实验酿酒芽殖酵母(Saccharomyces cerevisiae)和非洲粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces kephir)。 2. 试剂 1)酿酒芽殖酵母的培养基 (1)YPD(YPED)液体培养基(用于酵母菌 摇培,100mL) 细菌 培养用蛋白胨(Bacto-peptone) 2g 细菌 培养用酵母提取物 (Bacto-Yeast extract) 1g 葡萄糖(Glucose,配成40
酿酒酵母感受态细胞的制备 (1)从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 ml YPD液体培养基,30℃,250 rpm 培养过夜。 (2)测定过夜培养物的OD600值为3.0~5.0之间。 (3)将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2~0.4。 (4)在28~30℃摇床中继续培养3~6 hr,使其OD600值达到0.6~1.0。 (5)于室温1500 g 离心5 min 收集酵母细胞,弃上清。 (6)用10 ml 洗液洗酵母
kephir)。 2. 试剂 1)酿酒芽殖酵母的培养基 (1)YPD(YPED)液体培养基(用于酵母菌摇培,100mL) 细菌培养用蛋白胨(Bacto-peptone) 2g 细菌培养用酵母提取物 (Bacto-Yeast extract) 1g 葡萄糖(Glucose,配成40%detrose贮液单独灭菌,4℃保存) 2g 加ddH2O至90mL,调pH值至4-5,定容至95mL,高温灭菌(121℃,15min)。待温度
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