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100ml
碧云天生产的Trizol是一种用于细胞或组织总RNA抽提的试剂。本产品采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法,抽提的方法和步骤完全相同。
Trizol的颜色和TRIzol相同,加入氯仿后上层呈无色,下层呈紫红色,便于吸取上层水相。
Trizol对动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提均适用。
Trizol可以抽提长达15 kb的RNA,也可以抽提microRNA等小RNA。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。
Trizol抽提所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。
裂解细胞或和组织共匀浆时,Trizol可以保持样品中RNA的完整性,即可以有效抑制RNA的降解。
每一百万细胞用Trizol抽提可得5-15μg RNA;每毫克组织用Trizol抽提可得1-10μg RNA。产量因细胞和组织不同而异。
抽提两个样品约需一小时。
Trizol抽提所得RNA可直接用于Northern,点杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase protection assay,cDNA克隆,以及RT-PCR;也可以用于基因表达芯片分析、高通量测序(deep sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。
碧云天生产的Beyozol(R0011)和Trizol(R0016)的成分有细微差别,实际抽提效果无任何显著差异。
每100ml Trizol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| R0016 | Trizol | 100ml |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件:
4℃保存,一年有效。
注意事项:
需自备氯仿,异丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。DEPC(ST036),DEPC水(R0021)可向碧云天订购。
所有离心管,枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或Milli-Q级水中,处理过夜,灭菌即成DEPC水。
使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA,推荐先加入适量Trizol,并裂解样品后冻存。
必须戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。
Trizol含有毒物质苯酚,避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触Trizol,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。
Trizol抽提总RNA的同时,理论上也可抽提蛋白和DNA,但未经测试。有兴趣者可按Invitrogen公司的TRIzol的操作步骤进行操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验自己整理的protocol,希望对大家有所帮助! Preparations: 1. 高压2遍的物品及试剂:Ep管[大、中、小] 移液枪头[大、中、小] 0.1%DEPC[sigma]水—v/v, 室温静置过夜-高压2遍(大Ep管分装 后冻与-20℃) 2. 试剂:Trizol[invitrogen](4度) 100%无水乙醇(生产日期近,越久的挥发越多;及时盖盖) 氯仿(三氯甲烷CH3Cl3) 异丙醇 3. 其它:手套【需要勤换-防止RNA酶降解RNA】;口罩;冰盒
相关专题 利用TRIZOL试剂提取细胞中的总RNA非常有效,几乎是相关实验人员总RNA提取 实验的必学之招。然而有时,实验结果却不总是那么完美,无RNA沉淀、抽提率低、污染等问题挥之不去,那么在到底是哪里的问题呢?怎么办好呢?还是一起来看看前人总结的实验流程和疑难解答,再对照看看自己的实验设计吧。 [实验原理] Trizol试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整
以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
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