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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
500
- 英文名:
EZ-press RNA Purification Kit
- 保质期:
有效期12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。
- 供应商:
EZBioscience
- 保存条件:
gDNA Remover置于-20°C保存;其余组分室温保存。
- 规格:
100 Preps
产品简介
本产品提供了一种简单、快速、可靠的方法,用于从多种来源的动物细胞分离纯化高质量的总RNA,无需使用苯酚、氯仿、异丙醇和DEPC水等有毒物质。纯化后的总RNA适用于多种下游应用,包括:RT-PCR、RT-qPCR等。
产品组分
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组分 |
B0004D (100 Preps) |
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Lysis Buffer |
55 ml |
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Wash Buffer*1 |
13 ml |
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Elution Buffer |
10 ml |
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gDNA Remover |
220 μl |
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Spin Columns for RNA (with Collection Tubes) |
100 Preps |
注:*1. Wash Buffer首次使用前,请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀。
保存条件
gDNA Remover置于-20°C保存;其余组分室温保存。有效期12个月。过期日期请查看产品标签的有效期信息。
产品特点
1. 简单快速:可在 ~ 8分钟内获取高质量的总RNA。
2. 安全无毒:无需苯酚、氯仿、异丙醇或DEPC水等有毒试剂,无需乙醇沉淀。
3. 纯度高:提取的RNA可用于多种下游实验,如RT-PCR、RT-qPCR等。
实验流程

注意事项
1. Wash Buffer首次使用前须加入52 ml的无水乙醇并充分混匀(Wash Buffer与无水乙醇的体积比为1:4),加好混匀后可在瓶身做好标记。
2. 建议把Elution Buffer分装为3 ~ 4份,以减小污染的概率。
3. RNA提取须在室温进行,提取过程中不可置于冰上。
4. 建议用6孔板或35 mm培养皿培养细胞,培养至细胞密度达到80%以上时进行RNA提取,不建议用100 mm培养皿培养的细胞直接裂解提取RNA,否则可能导致细胞裂解不充分或离心柱堵塞或导致基因组残留。
5. 样品裂解时为了防止吹打过程中产生过多的气泡,可在加入裂解液后将移液器量程调至450 μl,吹打30下左右(吹时,液体不要完全吹出,枪头内可以留一点;吸时,液体也不要完全吸完,防止吸入气泡),使细胞充分裂解【裂解充分以后,如果不打算继续进行RNA提取,可将裂解产物转移到EP管中直接冻存在-80°C,下次解冻后恢复到室温使用,加无水乙醇混匀后继续进行后续的操作即可】。
6. RNA洗脱时一定要将洗脱液加到柱中央的膜上(如果洗脱液加到侧壁上,会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少),同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。
代表性实验结果
1. 本产品与TRIzol (Invitrogen)方法的对比测试:检测A549细胞中4个不同基因的mRNA表达水平

实验结果表明:使用本产品得到了优异的结果,比TRIzol法得到的结果更好,两组结果的相关系数可达R2=0.9898。结论:本产品能够很好地替代TRIzol方法进行细胞RNA的提取及逆转录,得到的结果优于TRIzol方法。
相关详细信息,请查看产品说明书。
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文献和实验♦ 适用范围:适用于快速提取植物组织细胞总RNA本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。♦ 储存事项:1. 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。2. 不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。♦ 产品介绍:独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭
操作步骤:提示:(1) 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇!(2) 使用前将10X红细胞裂解液RLB用DEPC处理水稀释到1X。(3) 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。1. 在适合大小的RNase free离心管中加入1体积(2. 室温放置10分钟(期间应该颠倒轻弹混匀数次帮助裂解红细胞)。如果RNA降解严重,可在冰上裂解,但是时间可长
漂洗液RW,重复一遍。 7. 将吸附柱RA放回空收集管中,13,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。 8. 取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在 70-90℃水浴中加热可提高产量), 室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。 9. 如果预期RNA产量>30μg,加30-50μl RNase free water重复步骤
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