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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
494
- 英文名:
DNA Polishing Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存,
- 规格:
20次
特别提示:包括DNA粘转平试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA粘转平试剂盒
英文名称:DNA Polishing Kit
产品货号:BTN60107
产品规格:20次
本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3′到5′的聚合酶活性和5′到3′外切酶活性,将3′或5′突出的DNA片段转化成平末端,用于克隆工作。
产品特点:
1. 简单,精心优化过的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA载体。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Pfu DNA Polymerase(3U/μL) | 20μl |
| 2×Polishing Buffer | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1. DNA片段的准备:
无论是来源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段,还是用限制性内切酶制备的DNA片段,粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份。沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法,离心柱DNA 吸附法和百奥莱博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 设置粘转平(Polishing)反应:
| 在一个干净的离心管中,分别加入 | |
| 3′或5′突出的DNA片段 | 10-500ng |
| 2×Polishing Buffer | 25μL |
| Pfu DNA polymerase | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时。 | |
注意:如果不使用热盖式PCR 仪器加热,则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。
3.反应后处理
粘转平反应后,样品可以放-20℃长期保存,也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10μL的连接反应体系,一般需要加入1-2μL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性,所以不必去除。但文献报道,去除后连接效率更高。
我公司销售的DNA粘转平试剂盒北京现货,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验培养菌液,13000g离心5分钟弃上清。按照试剂盒说明书提取DNA,再进行16SPCR扩增。 36.PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳(含溴化乙锭)分离,切下对应16S扩增子的条带(使用上述通用16S引物时产物为569bp),回收DNA。若PCR产物条带单一清晰,可直接纯化产物。 37.对DNA进行测序,鉴定细菌种类。 类器官活力检测 38.用1mL冰浴(4℃)DMEM收集培养的类器官,转移至15mL离心管,补加4℃DMEM至10mL。 39.300g离心5分钟,弃上清。 40.按照前述方法
程度都会直接影响纯度和提取效率。全程低温、分步操作、标志物对照,有助于获得纯度和回收率稳定的核质蛋白样品,满足后续 Western blot、免疫共沉淀等实验需求。 关于晶莱 晶莱生物创立于2016年,拥有北京(北京晶莱华科生物技术有限公司)及长沙(湖南晶莱生物技术有限公司)两个研发机构,是专注于生物医药临床前研发与基础医学科研服务的国家高新技术企业及专精特新企业。依托北京、长沙两地的3000余平实验平台,晶莱构建了8个研究平台,可为客户提供
关于晶莱 晶莱生物创立于2016年,拥有北京(北京晶莱华科生物技术有限公司)及长沙(湖南晶莱生物技术有限公司)两个研发机构,是专注于生物医药临床前研发与基础医学科研服务的国家高新技术企业及专精特新企业。依托北京、长沙两地的3000余平实验平台,晶莱构建了8个研究平台,可为客户提供包括临床前CRO、类器官模型构建、动物寄养、动物模型构建、细胞型构建、药效及各类表型、机制、通路等全方位的研究服务。 截至目前,晶莱生物已与国内超过1000家生物医药公司、高校及医院建立了紧密
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