pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞)厂家在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞)厂家
编号：SY0023
规格：1μg
重组蛋白功能研究时，常需要将其在细胞内定位到具体的细胞器，例如细胞核（ nucleus）内、细胞质（ cytoplasm）内、线粒体（mitochondria）或内质网（endoplasmic reticulum）上等。而细胞内某种蛋白的存在部位取决于蛋白序列中的“定位序列”（targeting sequences）或“信号肽”，这些序列可能位于蛋白质的N端、C端或蛋白质内部。一旦蛋白质被转运到最终细胞部位，这些序列可能会被保留，也可能被切除。研究者可以根据自己的研究目的，将感兴趣的ORF片段构建到表达载体中进行研究。

pCMV/myc/mito线粒体定位表达载体是以pcDNA3.0为基本骨架改造的质粒，可进行哺乳动物细胞瞬转和稳转。具有多克隆位点，可将任何重组蛋白导向至线粒体内。

产品性质：
质粒类型：哺乳动物细胞表达
大小：4967
启动子类型：CMV
蛋白标签：C端Myc标签
抗性：Amp

储存条件：-20℃，有效期半年。

注意事项：
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本载体在重组蛋白C端加有Myc标签，可用于检测重组蛋白表达。如果不要带有Myc标签，可在重组蛋白基因中加入终止密码子。

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·乙酰丁香酮
编号：SY0609
英文名称：Acetosyringone
规格：1g
乙酰丁香酮是一种结构上与*乙酮（acetophenone）和2,6-二甲氧基*酚（2,6- dimethoxyphenol）相似的酚类化合物。最初报道与木脂素/*丙素型植物化合物相关，植物来源广泛，特别是处于创伤和其他生理变化的植物。乙酰丁香酮（Acetosyringone, AS）可以诱导根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）Ti质粒和发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）Ri质粒携带的VirA基因的活化和高效表达，从而启动其他Vir基因表达，切割下质粒上的一段T-DNA单链，促进其转化和整合入寄主植物基因组内。目前普遍应用于农杆菌介导的遗传转化研究中。

本品属于植物组织培养级，纯度≥ 98%，植物转化研究的常用浓度为50-200 μM。

CAS：2478-38-8
分子式：C10H12O4
分子量：196.2
外观：白色至黄色粉末或晶体
熔点：122-125 ℃
溶解性：微溶于水，溶于DMSO，乙醇和热甲醇
纯度：≥ 98%
储存条件：室温
结构式：



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·强力*化乙锭去除剂
编号：SY0248
英文名称：EB Eraser
规格：50T
强力 EB 去除剂是专用于清除*化乙锭（EB）污染的产品，通过与EB分子中的*基反应和断开EB分子中的含氮杂环而有效破坏EB的分子结构，清除EB的致癌性，从而实现清洁EB污染的目的。本产品可以消除EB的荧光，并使其致突变性降低99.5%以上。

适用范围广泛，可用于清除电泳缓冲液、生化溶液和固体表面的EB污染（如实验台、离心机、玻璃器皿、不锈钢制品等）。

使用简单、方便，使用强力EB去除剂将EB污染物处理后，再丢弃可以保护环境不受EB污染物影响。

注意事项

1) 溶液 A 有腐蚀性，并且操作EB 过程中为保护您的安全，请戴手套和眼罩操作。
2) 本产品暴露于空气中的时间不宜过长，使用完毕请立即密封保存于避光通风处。
3) 化学试剂配制和处理 EB 过程中可能有微量刺激有害气体产生，请在通风橱中操作。
4) 没有一种方法可以100%消除EB，因此即使处理后，应该戴手套小心操作，而不应该视为100%安全。有条件者，最好定期检测突变性，确保处理过程的正确。

操作步骤

一、各种污染溶液处理（100mL EB 污染溶液）

1.确保各种污染溶液中 EB 浓度不超过0.5mg/mL，如果浓度过高，先用水稀释到符合要求的浓度。
2.工作液准备：在通风橱，用去离子水将 2mL溶液A稀释到终体积20mL备用，将0.42g去毒剂B溶于水并定容到12mL备用。
3.将上述 20mL溶液A工作液和12mL去毒剂B工作液加入到100mL EB污染溶液中，仔细搅拌混匀（确保 pH≤3）。
4.室温放置反应 24 小时，用碳酸**调节pH 到5-9。
5.用大量水将反应物冲入水槽废弃。

二、各种固体表面污染处理

1.工作液准备：在通风橱，在300mL去离子水中加入4.2g去毒剂B，充分溶解后加入20mL溶液A，仔细搅拌混匀（pH 大约为1.8）。
2.确保电器都处于断电状态后，用纸巾浸泡刚准备好的工作液，仔细将污染表面擦拭干净，重复6次，每次换用新的浸泡了工作液的纸巾，最后用浸泡了干净去离子水的纸巾擦拭干净工作液，收集纸巾到一个指定处理用容器中。工作液pH 值为1.8，有轻微腐蚀性，不宜用来擦拭耐受力弱的物品，可改用去离子水浸泡的纸巾擦拭。擦拭前可用紫外灯帮助发现污染区，擦拭后帮助确认已经擦拭干净。
3.将这些污染纸巾浸泡在工作液中至少室温放置一个小时，用碳酸**调节pH到5-9后，液体用大量水冲入水槽，纸巾入垃圾堆。

运输与保存方法：冰袋运输。溶液A于-20℃保存，去除剂B于4℃保存。12个月内有效。


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·细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 647/PI)
编号：SY0473
英文名称：Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit
规格：20 rxn
Annexin V-Alexa Fluor 647/PI细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor 647标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝*酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor 647 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

试剂盒组份：
Annexin V-Alexa Fluor 647————————100 μl
PI Staining Solution (20 μg/ml)————200 μl
4×Binding Buffer————————————4 ml

注意事项

1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝*酸与Annexin V-Alexa Fluor 647的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3)如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4)试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
5)Annexin V-Alexa Fluor 647和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。

储存条件：4℃，有效期一年。

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