碱性磷酸酶活性检测

Caspase活性检测系列（分光光度法）检测原理及操作指南

酶活性检测： A、取Ac-特异性多肽-pNA和2 ×反应液，溶解后冰浴备用。 B、 2 ×反应液工作液制备：每50 μL 2 ×反应液加入0.5 μL DTT。 C、吸取45 μL含100-200 μg蛋白的细胞或者组织裂解上清，如体积不足45 μL则用裂解液工作液补足至45 μL（各组采用相同的蛋白含量和体系进行测定和比较）。 D、按照下表设置反应体系： 注意： 1） 在设置反应体系时先加入反应工作液，再加入待测样本后适当混匀，注意避免产生气泡。 2） 最后加入Ac-特异性多肽-pNA

碱性磷酸酶的分离与纯化

一、实验目的 1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理； 2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。 二、实验原理 有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀，其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的介电常数为80，82％的乙醇溶液的介电常数为40。溶液的介电常数降低意味着溶质分子间异性电荷库仑引力增加，从而使溶质的溶解度降低

细胞因子活性检测

，间接推算出细胞因子的生物学活性单位。 一、IL-1生物学活性检测 白细胞介素-1（IL-1）主要是由活化的单核-巨噬细胞合成和分泌的一种细胞因子，具有活化淋巴细胞、协同刺激胸腺细胞增殖、参与抗体产生和促炎症反应等多种生物学功能。IL-1有IL-1α和IL-1β构成，结合同种受体，表现相同的生物学活性。用于检测IL-1生物活性的方法有多种，如小鼠胸腺细胞增殖法、D10G4.1细胞增殖法、EL-4细胞测定法等。