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文献和实验的移液过程提供较好的稳定性,以及在进行自动机械处理时提供更好的机械强度。PCR 平板可分为无裙边,半裙边和全裙边。 无裙边板缺少周围的面板(图 A)。这种形式的反应板可与绝大多数 PCR 仪和实时 PCR 仪的模块适配,但不适用于自动化应用。 半裙边板在板的边缘周围具有短的边缘(图 B),在移液过程中提供足够的支撑,Applied Biosystems PCR 仪大多数均采用半裙边板。 全裙边的 PCR 板具有覆盖板高度的边缘面板(图 C)。这种板形式适用于具有突出模块的 PCR 仪
人。5.加完MTT反应3-4h后,从培养箱取出96孔板的动作要轻柔,避免振荡结晶,使其滑落.你可以试着将96孔板倾斜30度角,然后用*尖慢慢吸,有的细胞可以用排枪一起吸,有的则要耐心的一个个用*头吸,*尖的力度和方向要保证每个孔都一致。不要让*头接触到孔底,且一旦倾斜孔板后就不要反复倾斜放平,这样也会使结晶脱落。6.用医用的注射器加上针头吸取液体的,吸取时要把板子斜放,沿着壁吸取就好了!这次MTT我用1ml针头仔细吸培养液,觉得比其它方法可靠,一般不会吸走紫色结晶.避免清除上清而改进的方法由于一般可离心
CsCl 1.2 (26.8 g + 92 mL 10 mM Tris-HCl,pH=7.9),再小心加入病毒上清液至体积达到20ml。平衡后,4℃下 23000rpm离心90min (SW28转头),用注射器抽吸下层蓝白色病毒带) 4、病毒透析去盐:配置透析液(10 mM Tris pH 8.0,2 mM MgCl2,5% sucrose),灭菌处理。4℃透析,更换3次透析液,可基本去除CsCl,病毒保存于-80℃。 六、病毒滴度测定(TCID50) 1 、细胞准备:96孔板中接种100μl
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