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KIRGEN秉承“致力于改善人类健康并持续为客户创造更多价值”的企业宗旨,专注于改进实验室条件,提高实验和检测的质量与速度,推进高质量科学研究和临床检验。产品被广泛应用于生命科学研究机构、医疗机构、临床实验室、工业单位等。
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文献和实验人。5.加完MTT反应3-4h后,从培养箱取出96孔板的动作要轻柔,避免振荡结晶,使其滑落.你可以试着将96孔板倾斜30度角,然后用*尖慢慢吸,有的细胞可以用排枪一起吸,有的则要耐心的一个个用*头吸,*尖的力度和方向要保证每个孔都一致。不要让*头接触到孔底,且一旦倾斜孔板后就不要反复倾斜放平,这样也会使结晶脱落。6.用医用的注射器加上针头吸取液体的,吸取时要把板子斜放,沿着壁吸取就好了!这次MTT我用1ml针头仔细吸培养液,觉得比其它方法可靠,一般不会吸走紫色结晶.避免清除上清而改进的方法由于一般可离心
培养基中,37℃振摇过夜。 (2)接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基,37℃振摇,至OD600 达到0.4. (3)迅速将培养物置于冰浴中30min,至充分冷却。 (4)将菌液转移至预冷的离心管中,4℃下以2500r/min离心15 min,弃培养液,回收细胞。 (5)以10ml预冷的10%甘油洗涤沉淀,低温离心,共两次。 (6)加约1ml(适量)预冷的10%甘油重悬沉淀,稀释悬液100倍,测量OD600,至稀释浓度为2-3×1010个细胞/ ml (1.0 OD600约
。将MTT完全混匀后,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,分装避光(避光袋或是黑纸、锡箔纸包住)可长期保存于-20度。按细胞培养板每孔需加10ul计算,一般每96孔板约需1ml,所以分装时可考虑每管分装1ml。 1.2对于大包装,可按上述方法称取一部分溶解,也有人将粉剂分装在EP管里,用的时候现配,直接往培养板中加。 注意事项: 1. 在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。 配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感 MTT一般最好现用现配,过滤后4度避光保存两周内(个人
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