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文献和实验-Cl, pH8.0 1.2114 20% (v/v) Glycerol 20g 4% (w/v) SDS 4g 0.2% Bromophenol blue 0.2g 200mM DTT 20ul 5x Running buffer: 1 L 15.1 g Trizma base (= 125m M) 94g Glycine (= 1.25 M) 50ml 10%SDS (= 0.5%)--add last Do not adjust the pH!! 10x Blotting
,在通风橱中,加入2ml DEPC到2升去离子水中,终浓度为0.1%的DEPC。迅速盖上盖子,混匀,然后放在摇床中中速摇荡至少4hr,再高压灭菌。灭菌时将瓶盖松开,15磅灭菌20min。2、10 × FA Buffer(formaldehyde agarose buffer:200 mM的MOPs,50 mM的NaAc,10 mM的EDTA):配制500ml,称取3.4g NaAC•3H2O放入1000ml烧杯中,加入400ml DEPC 处理过的去离子水,加入搅拌子,放在磁力搅拌器上溶解。然后加
and spin down. 4. Incubate at 90-95'C for 5 minutes to denature. Ice then spin down. 5. Incubate O/N at 42-45'C in a dry incubator or a water bath. 6. RNase digestion: Dilute Soln. R in Soln. Bx 1:100. Add 200 ul to each sample. Make a 1:300 dilution
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