0.1ml超薄96孔板，无裙边，白色

重组腺病毒构建、扩增及纯化

CsCl 1.2 （26.8 g + 92 mL 10 mM Tris-HCl，pH=7.9），再小心加入病毒上清液至体积达到20ml。平衡后，4℃下 23000rpm离心90min （SW28转头），用注射器抽吸下层蓝白色病毒带） 4、病毒透析去盐：配置透析液（10 mM Tris pH 8.0，2 mM MgCl2，5% sucrose），灭菌处理。4℃透析，更换3次透析液，可基本去除CsCl，病毒保存于-80℃。 六、病毒滴度测定（TCID50） 1 、细胞准备：96孔板中接种100μl

重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作

  将菌液转移至预冷的离心管中，4℃下以2500r/min离心15 min，弃培养液，回收细胞。 ²       以10ml预冷的10%甘油洗涤沉淀，低温离心，共两次。 ²       加约1ml（适量）预冷的10%甘油重悬沉淀，稀释悬液100倍，测量OD600 ， 至稀释浓度为2-3×1010 个细胞/ ml (1.0 OD600 约2.5×1010 个细胞/ml)。分装，-80℃或液氮保存待用。 2  病毒骨架质粒转化大肠杆菌，扩增，纯化。 3  将1-5µl

单克隆抗体制备

/C小鼠。 2．免疫方案 　　 选择合适的免疫方案对于细胞融合杂交的成功，获得高质量的McAb至关重要。一般在融合前两个月左右根据确立免疫方案开始初次免疫，免疫方案应根据抗原的特性不同而定。 （1）可溶性抗原免疫原性较弱，一般要加佐剂，半抗原应先制备免疫原，再加佐剂。常用佐剂：福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂。 初次免疫 抗原1～50μg加福氏完全佐剂皮下多点注射或脾内注射（一般0.8～1ml,0.2ml/点） ↓3周后 第二次免疫 剂量同上，加福氏不完