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No serum culture medium for human embryonic stem cells
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切勿冻存,有效期24个月
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上海泽叶生物科技有限公司
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长时间储存于4℃
- 规格:
500ml
人胚胎干细胞无血清培养基,经筛选配比的无血清添加物及其他辅助成分。该产品适用于人胚胎干细胞无血清条件的培养;可维持人胚胎干细胞良好的增殖速率,并保持良好的分化能力。使用本产品无需添加血清或血清替代物。
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文献和实验。 4、培养细胞时,如何去除血清来源的外泌体? 多数情况下,细胞在体外培养时需要血清,而血清中一般都含有外泌体,为避免血清对细胞外泌体的污染,可采用以下两种方法: 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体; 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清(或者外泌体专用培养基)在什么时候使用? 使用无外泌体血清培养基:细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后,细胞汇合度在60% - 70% 时,移去原有含血清的培养基,换成新鲜的无外泌体血清培养基,继续
人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血,用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释,上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中,先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液(1.077 g/mL),再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液,血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注:Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温,温度过高会导致分离不明显,温度过低会导致密度过大,同样分离效果不好, 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
。 4、低温原则 所取样本离体后,应尽快置于干冰或 -80℃ 冰箱中,并保证在实验前始终处于 -70℃ 以下, 以避免外泌体降解。 二、样本制备指南 1、细胞上清 1) 细胞在正常含有血清的培养基中培养一定时间,贴壁细胞密度在 70%-80%,悬浮细胞密度在 60%-70%; 2) 对于贴壁细胞,去除原有培养基,加入适量的 PBS 缓冲液冲洗一次,彻底去除血清;对于悬浮细胞,300 g ,4℃,10 min 收集细胞,然后换为新的不含外泌体的培养基或者无血清替代培养基继续培养 24-48 h, 根据细胞
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