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大量
- 英文名:
Oligo d(T)15 Primer
- 保质期:
室温保存
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃避光保存
- 规格:
20ul
Oligo d(T)15 Primer
产品说明
该制品为含有15个T(胸腺嘧啶)的寡聚核苷酸,使用HPLC纯化,纯度大于99%。
产品组分
| 货号 |
KL2021 |
| Oligo d(T)15 Primer(50 μM) |
20 μl |
| 说明书 |
1份 |
产品形态
无色液体。
保存条件
-20℃保存。
质量标准
1)HPLC确认纯度(>99%)。
2)1 nmol的本制品和 2 μg的5S rRNA在37℃条件下反应24小时,RNA的电泳图像不发生变化。
产品用途
由mRNA合成cDNA时作反转录引物使用;
进行PCR反应时,可根据需要调节用量或用DEPC处理水(R2041/R2042)稀释至适当浓度使用。
注意事项
避免反复冻融。
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文献和实验引物和产物的各个碱基的组成比例和Tm值。上下游引物的GC%需要控制在40%~60%,而且上下游引物之间的GC% 不要相差太大。Tm值共有3个,分别采用三种方法计算出来,包括nearest neighbor method、%GC method和2(A+T)+4(G+C)method,最后一种应该是Primer5所采用的方法,Tm 值可以控制在50~70度之间。 第五项为False Priming Sites,即错误引发位点,在Primer5中虽然也有False priming分析,但不如oligo详细
Synthesis of Radiolabeled, Subtracted cDNA Probes Using Oligo(dT) as a Primer
2. To the chilled microfuge tube, add: 0.1 M dithiothreitol 2.5 μl placental RNase inhibitor 200 units oligo(dT)12-18 10 μl 10x reverse transcriptase buffer 25 μl 20 mM solution of dGTP, dATP, and dTTP 10 μl 125 μM dCTP 10 μl 10 mCi/ml
最近刚开始做PCR,参考了很多与引物设计相关的帖子,结合自己使用primer5和oligo的体会,想谈谈自己设计引物的方法和步骤,恳请各位前辈指正。 RT-PCR引物设计原则和方法 在NCBI上搜索到该基因,找到该基因的mRNA,在CDS选项中,找到编码区所在位置,在下面的origin中,Copy该编码序列作为软件查询序列的候选对象。 打开Primer Premier5,点击File-New-DNA sequence, 出现输入序列窗口,Copy目的序列在输入框内(选择
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