Origami(DE3)感受态细胞

细胞名称:    Origami(DE3), Origami DE3, Origami-DE3
菌株类型:    E.coli
培养基:    LB培养基
生长条件:    37 ℃,  有氧
基因型:    Origami(DE3)pLysS感受态细胞基因型
抗  性:    卡那，链霉素，四环素，氯霉素
质粒转化条件:    42 ℃热激
应    用:    蛋白表达, 含二硫键蛋白表达

诱导方法:    IPTG

菌株特点:    

Origami系列感受态细胞是K-12细胞的衍生而来，在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变，这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键，有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。研究表明使用Origami系列的 感受态细胞表达获得的活性二硫键蛋白比其他同类感受态细胞要多10倍左右。

Origami系列感受态细胞能够用于氨苄抗性质粒的蛋白表达，尤其是和pET32a载体能够完美搭配使用。pET32a载体含有thioredoxin (TRX)融合标签，能够高效提升胞质内蛋白二硫键的形成。

TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性，所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。为了减少细胞内多种分子间的二硫键的形成，含有TrxB和Gor基因突变的宿主菌被建议用于含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达。

DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。

含有pLSs质粒，pLySs质粒能够产生T7溶菌酶，可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。

亮氨酸缺陷型菌株。