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本产品由BL21(DE3)菌株开发而来,适用于无毒或低毒基因的高效表达,适用于T7启动子表达载体(如pET28a、pGEX4T-2)的高效表达。该菌株染色体整合有可被lacUV5启动子启动表达的噬菌体DE3区的T7 RNA聚合酶基因,因此该菌株可同时表达T7RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶。多个外源基因的小量表达试验均取得良好结果,表明该产品蛋白表达能力优异。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率可达1×108 cfu/µg,转化20 kb大小质粒效率无明显降低。
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文献和实验TOP10 chemically competent cells
Overview This protocol is a variant of the Hanahan protocol [1] using CCMB80 buffer for DH10B, TOP10 and MachI strains. It builds on Example 2 of the Bloom05 patent as well. This protocol has been tested on TOP10, MachI and BL21(DE3) cells
(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3
(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3
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