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OrigamiB(DE3)pLacI感受态细胞

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      OrigamiB(DE3)pLacI感受态细胞

    细胞名称:    OrigamiB(DE3)pLacI, Origami B(DE3)pLacI, Origami B-DE3-pLacI
    菌株类型:    E.coli
    培养基:    LB培养基
    生长条件:    37 ℃,  有氧
    基因型:    OrigamiB(DE3)pLacI感受态细胞基因型
    抗  性:    卡那,四环素,氯霉素
    质粒转化条件:    42 ℃热激
    应    用:    蛋白表达, 含二硫键蛋白表达

    诱导方法:    IPTG

    菌株特点:    
    Origami B系列菌株同样具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突变,但是该菌株是来源于BL21的lacZY基因突变株。所以,Origami B系列感受态细胞是集合BL21,Tuner和Origami三种细胞株的优点于一身。

    在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。

    TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性,所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。

    Origami B(DE3)感受态细胞来源于含有lacZY基因突变的BL21菌株,能够通过IPTG高效控制目的基因的表达。

    DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。

    pLacI基因型表明该菌株含有pACYC184质粒,该质粒含有Lac抑制子基因。

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    • 各种感受态细胞的区别、用途和特征

      摘要: 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征. Xl1-Blue菌株 基因型: endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+).

    • 各种感受态细胞的区别 用途 特征

      菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征

    • 很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择,现系统地解答一下,供新手借鉴。

      以 AccepTor TM 载体或 perfectly Blunt a 载体形式提供,便于快速 PCR 克隆 · 目标基因无基础水平表达,消除了毒性基因产物相关的质粒不稳定性 · 表达水平与经典 pET 载体相同 · 用 Tuner TM (DE3)pLacI 宿主菌实现真正的表达水平“变阻器”控制。 PET 系统:大肠杆菌中蛋白表达的金字招牌    pET 载体中,目标基因克隆到 T7 噬菌体强转录和翻译信号控制之下,并通过在宿主细胞提供 T7 RNA 聚合酶来诱导表达。 Novagen

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