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- 详细信息
- 文献和实验
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54
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
10ml|50ml
英文名称:
产品规格:10ml|50ml
发货周期:1~3天
荧光染料Hoechst 33342 具有一定的细胞膜透性,能少许进入正常细胞膜,使其染上低蓝色。Hoechst33342 可以用来复染细胞的细胞核。
对于非固定的活细胞来说,hoechst33342 可以起到区别凋亡和正常细胞的作用,因为凋亡细胞的膜通透性增强,因此进入细胞中的Hoechst 33342 比正常细胞的多,荧光强度要比正常细胞中要高,此外,凋亡细胞的染色体DNA 对于细胞的称染来说,可以配以适当的0.1% Triton X-100 通透,从而是所有细胞细胞核有效的染上hoechst 染料。
储存:4℃,避光,有效期6个月。
Hoechst 33342染色液使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
富含亮氨酸重复家庭蛋白1抗体英文全称Protection of telomeres protein英文简称POT检测范围6145nmol/L-4000pg/ml
富含亮氨酸重复家庭蛋白4抗体英文全称Thyroglobulin antibody英文简称TG-Ab检测范围6146nmol/L-40U/ml
脂肪酶家庭成员K抗体英文全称Coccidia英文简称Coccidia 检测范围6147nmol/L-
晚期包膜蛋白2B抗体英文全称Mycoplasma synoviae英文简称MS检测范围6148nmol/L-
晚期包膜蛋白1抗体英文全称selenoprotein W英文简称SEPW检测范围6149nmol/L-80ng/ml
富含亮氨酸样酸性核蛋白抗体英文全称AIV-H7英文简称AIV-H7检测范围6150nmol/L-
富含亮氨酸重复家庭蛋白2抗体英文全称Dihydrotestosterone英文简称DHT检测范围6151nmol/L-20ng/ml
富含亮氨酸重复死亡结构域蛋白抗体英文全称cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen英文简称CⅠCP检测范围6152nmol/L-20ng/ml
脂质磷酸磷酸酶相关蛋白1/可塑性相关基因3抗体英文全称H9N2 antibody英文简称H9N2-Ab检测范围6153nmol/L-
层粘蛋白α2抗体英文全称Reducing sugar英文简称RS检测范围6154nmol/L-20ug/ml
白介素1β抗体英文全称Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4英文简称WNT4检测范围6155nmol/L-2400pg/ml
荧光素酶抗体英文全称C-telopeptide of typeⅠcollagen英文简称CTX-Ⅰ检测范围6156nmol/L-20ng/ml
亮氨酸氨基肽酶3抗体英文全称Undenatured Collagen Type II英文简称UC-II检测范围6157nmol/L-80ng/ml
肝脏型脂肪酸结合蛋白抗体英文全称Avian Influenza H9 antibody英文简称H9检测范围6158nmol/L-
层粘蛋白α1抗体英文全称tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 3英文简称TRAIL-R3检测范围6159nmol/L-2000pg/ml
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文献和实验Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining
of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells
1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。
韶光逐浅 我想问一下Hoechst凋亡染色试剂盒国产的哪个公司的好啊? yunitongxing 原装进口试剂 韶光逐浅 好的,多谢啦 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
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