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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
37
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
10ml
中文名称:SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×)
英文名称:
产品规格:10ml
发货周期:1~3天
产品保存:-20℃保存,一年有效
产品说明:SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer,1×),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。可以直接用于细胞或组织样品的裂解,并用于后续常规的SDS-PAGE 蛋白样品的上样。使用 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷;缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford 法或BCA 法测定蛋白浓度。这样蛋白上样量的均一性就较难控制,需要借助考马斯亮蓝等的染色结果或
Western的检测结果,来调整上样量。当细胞量或组织用量能控制得比较均一时,使用本裂解液直接裂解获取蛋白样品会比较便捷。
本产品也可以用于 SDS-PAGE 时待上样蛋白样品的稀释等。
注意事项:
1.SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)中含少量 DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
2.SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)必须完全溶解后再使用。
使用说明:
1.在室温或不超过 37℃的水浴中溶解 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间 置于水浴中。
2.对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)和细胞充分接触。通常 SDS-PAGE 上样缓冲液
(1×)接触细胞 1-2 秒后,细胞就会被裂解。裂解后的样品收集到一洁净离心管内。
3.对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1×)的比例加入 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再进行裂解。
4.对于组织样品:
A.把组织剪切成细小的碎片。
B.按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)的比例加入 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)。(如果裂解不充分可以适当添加更多的SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×),如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)的用量。)
C.用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
D.充分裂解后,将样品收集到一洁净离心管内。
说明:如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈 vortex 使样品裂解充分。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
5.100℃或沸水浴加热 5-10分钟,以充分变性蛋白。说明:煮沸前通常会发现蛋白样品内有粘稠的半透明状物体,通常在本上样缓冲液内沸水浴煮沸 8-10分钟后可以确保该粘稠的半透明状物体消失,以便于后续的上样操作。
注意:如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组 DNA 含量较高,煮沸 5-10分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸 5-10分钟或者加入适量 1×的蛋白上样缓冲液后再煮沸 3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组 DNA 上的蛋白充分释放,同时会导致基因组 DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,这样就不会影响后续的上样操作了。
6.冷却到室温后,室温稍离心一下以沉淀可能出现的杂质等,上清即可直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×) 细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些:
1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程:细胞培养。
注意事项:
1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,为取得良好的使用效果,*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中,可能会导致检测试剂中出现少量沉淀,此时宜平衡至室温,并尽量溶解。如仍有残留的不溶物,可以离心去除后使用,经测试不会影响后续的检测效果。
2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。
3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法,实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
IRF8 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
FUT3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
P2RY2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
SDC2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
IRF3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
KMT2B rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
EVI2B rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
OMG rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
IL6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CAMKK2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
SLC22A2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
IFNL2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
DDX58 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
DEK rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
IL2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
Androstadienedione钼标准溶液(100µg/mL,基体: 1%HCl) 分子式:C18H18O2 性状:Powder 纯度:98.0%
Nandrolone phenylpropionate水质镍标样(浓度范围:0.959-1.01(mg/L),分析标准品) 分子式:C17H18O3 性状:Oil 纯度:92.0%
Nandrolone铌标准溶液(1000μg/ml) 分子式:C18H18O2 性状:Powder 纯度:98.0%
Guaiacol glycidyl ether镍标准溶液(100μg/mL,基体:1%HNO3) 分子式:C18H18O 性状:Powder 纯度:96.0%
N-(2,6-Diphenylmethyl)-1-pi acetylamine钾标准溶液(500mg/L,溶剂:水) 分子式:C24H30O8 性状:Powder 纯度:98.0%
2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid钾标准溶液(1000µg/mL,基体:1%HCl) 分子式:C25H36O9 性状:Powder 纯度:%
Cinnamyl 3-aminobut-2-enoate镨标准溶液(1000μg/ml) 分子式:C21H26O3 性状:Yellow powder 纯度:98.0%
2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate钌标准溶液(1000μg/ml,介质:2.0mol/L HCl) 分子式:C29H40O4 性状:Powder 纯度:96.0%
D-Mannitol diacetonide铑标准溶液(1000μg/ml,溶剂:2.0Mol/L HCl) 分子式:C19H22O5 性状:Oil 纯度:98.0%
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×) 中文名称 磷脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗体
别 名 PK3CG_HUMAN; PI 3 Kinase catalytic subunit gamma; Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit gamma isoform; PI3-kinase subunit gamma; PI3K-gamma; PI3Kgamma; PtdIns-3-kinase subunit gamma; Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase 110 kDa catalytic subunit gamma; PtdIns-3-kinase subunit p110-gamma; p110gamma; Phosphoinositide-3-kinase catalytic gamma polypeptide; Serine/threonine protein kinase PIK3CG; 1 phosphatidylinositol 3 kinase; p120-PI3K; p120 PI3K; 5-bisphosphate 3-kinase 110 kDa catalytic subunit gamma; 5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit gamma isoform; p110 gamma; Phosphatidylinositol 3 kinase catalytic 110 kD gamma; Phosphatidylinositol 3 kinase gamma, p110 gamma; Phosphatidylinositol 3 kinase, catalytic, gamma polypeptide; Phosphatidylinositol 4 5 bisphosphate 3 kinase 110 kDa catalytic subunit gamma; Phosphatidylinositol 4 5 bisphosphate 3 kinase catalytic subunit gamma; Phosphatidylinositol 4 5 bisphosphate 3 kinase catalytic subunit gamma isoform; Phosphatidylinositol-4; Phosphoinositide 3 kinase catalytic gamma polypeptide; Phosphoinositide 3 kinase gamma catalytic subunit; PI3-kinase subunit gamma; PI3CG; PI3K; PIK3; Pik3cg; PtdIns-3-kinase subunit gamma; PtdIns-3-kinase subunit p110-gamma; Serine/threonine protein kinase PIK3CG.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 免疫学 信号转导 激酶和磷酸酶 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
蛋白分子量 predicted molecular weight: 121kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PIK3 gamma
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
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文献和实验-SH 的增加,可衡量蛋自质的变性程度。在碱性条件下,-SH 可被亚硝基铁氰化钠N[Fe(NO)(CN) 5 ] 2- 氧化成-S-S(二硫键),氧化剂的铁由高价还原成低价,其配合物呈红色。 产生红色配合物的量与-SH 量成正比,可用比色法(520nm)测定,由于-SH 在重金属离子催化下,易被空气氧所氧化,故在反应体系中加入少许氧化物抑制这种反应。 三、 仪器 、原料和试剂 仪器 试管1.5cm×15cm(×27
入20.9g MOPs,放在磁力搅拌器上溶解。再加1.86g EDTA二水二钠,放在磁力搅拌器上溶解。用1M灭过菌的NaOH 调PH至7.0(约用NaOH 40ml),用DEPC 处理过的去离子水定容至500ml,装入棕色瓶中,写好标签,室温避光保存。4、5 × 甲醛变性胶加样缓冲液(5×loading buffer): 配制10ml。预先配制水饱和的溴酚蓝溶液:在1.5ml 离心管中加入约0.1mg溴酚蓝,加入1ml DEPC水溶解,充分振荡溶解,离心,可见离心管底部有溴酚蓝粉末剩余,上层液体
痕组织的玻璃样变 >胶原纤维变粗,互相融合呈均质梁状×320 3.纤维素样变性(纤维蛋白样变性)为间质胶原纤维及小血管壁的一种变性。病变部位的组织结构逐渐消失,变为一堆境界不甚清晰的颗粒状、小条或小块状无结构物质,呈强嗜酸性红染,状似纤维素,并且有时呈纤维素染色,故称此改变为纤维素样变性(fibrinoid degeneration),其实为组织坏死的一种表现,因而也称为纤维素样坏死(fibrinoid necrosis)。 纤维素样变性主要见于急性风湿病及结节性动脉周围炎等变态
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