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SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×)

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  • 上海一研
  • EY-24324
  • 进口、国产
  • 2025年07月12日
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      详见说明书

    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      10ml

    以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
    产品细节图片1
      中文名称:SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×)  
    英文名称:

    产品规格:10ml
    发货周期:1~3天
    产品保存:-20℃保存,一年有效
    产品说明:SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer,1×),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。可以直接用于细胞或组织样品的裂解,并用于后续常规的SDS-PAGE 蛋白样品的上样。使用 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷;缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford 法或BCA 法测定蛋白浓度。这样蛋白上样量的均一性就较难控制,需要借助考马斯亮蓝等的染色结果或
    Western的检测结果,来调整上样量。当细胞量或组织用量能控制得比较均一时,使用本裂解液直接裂解获取蛋白样品会比较便捷。
    本产品也可以用于 SDS-PAGE 时待上样蛋白样品的稀释等。
    注意事项:
    1.SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)中含少量 DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
    2.SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)必须完全溶解后再使用。
    使用说明:
    1.在室温或不超过 37℃的水浴中溶解 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间 置于水浴中。
    2.对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)和细胞充分接触。通常 SDS-PAGE 上样缓冲液
    (1×)接触细胞 1-2 秒后,细胞就会被裂解。裂解后的样品收集到一洁净离心管内。
    3.对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1×)的比例加入 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再进行裂解。
    4.对于组织样品:
    A.把组织剪切成细小的碎片。
    B.按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)的比例加入 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)。(如果裂解不充分可以适当添加更多的SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×),如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)的用量。)
    C.用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
    D.充分裂解后,将样品收集到一洁净离心管内。
    说明:如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈 vortex 使样品裂解充分。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
    5.100℃或沸水浴加热 5-10分钟,以充分变性蛋白。说明:煮沸前通常会发现蛋白样品内有粘稠的半透明状物体,通常在本上样缓冲液内沸水浴煮沸 8-10分钟后可以确保该粘稠的半透明状物体消失,以便于后续的上样操作。
    注意:如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组 DNA 含量较高,煮沸 5-10分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸 5-10分钟或者加入适量 1×的蛋白上样缓冲液后再煮沸 3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组 DNA 上的蛋白充分释放,同时会导致基因组 DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,这样就不会影响后续的上样操作了。
    6.冷却到室温后,室温稍离心一下以沉淀可能出现的杂质等,上清即可直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
    产品细节图片2
    SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×) 细胞生物学研究有以下几个方面:
    细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
    ①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
    ②生物膜与细胞器的研究;
    ③细胞骨架体系的研究;
    ④细胞增殖及其调控;
    ⑤细胞分化及其调控;
    ⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
    ⑦细胞的起源与进化;
    ⑧细胞工程.
    细胞生物学研究的常用技术有哪些:
    1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
    2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
    3.细胞工程:细胞培养。
    注意事项:
    1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,为取得良好的使用效果,*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中,可能会导致检测试剂中出现少量沉淀,此时宜平衡至室温,并尽量溶解。如仍有残留的不溶物,可以离心去除后使用,经测试不会影响后续的检测效果。
    2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。
    3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法,实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。

    产品细节图片3
    IRF8 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
    FUT3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    P2RY2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
    SDC2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    IRF3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
    KMT2B rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    EVI2B rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    OMG rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    IL6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    CAMKK2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
    SLC22A2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    IFNL2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    DDX58 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
    DEK rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    IL2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    Androstadienedione钼标准溶液(100µg/mL,基体: 1%HCl)  分子式:C18H18O2  性状:Powder  纯度:98.0%

    Nandrolone phenylpropionate水质镍标样(浓度范围:0.959-1.01(mg/L),分析标准品)  分子式:C17H18O3  性状:Oil  纯度:92.0%
    Nandrolone铌标准溶液(1000μg/ml)  分子式:C18H18O2  性状:Powder  纯度:98.0%
    Guaiacol glycidyl ether镍标准溶液(100μg/mL,基体:1%HNO3)  分子式:C18H18O  性状:Powder  纯度:96.0%
    N-(2,6-Diphenylmethyl)-1-pi acetylamine钾标准溶液(500mg/L,溶剂:水)  分子式:C24H30O8  性状:Powder  纯度:98.0%
    2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid钾标准溶液(1000µg/mL,基体:1%HCl)  分子式:C25H36O9  性状:Powder  纯度:%
    Cinnamyl 3-aminobut-2-enoate镨标准溶液(1000μg/ml)  分子式:C21H26O3  性状:Yellow powder  纯度:98.0%
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    SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×) 中文名称  磷脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗体

         PK3CG_HUMAN; PI 3 Kinase catalytic subunit gamma; Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit gamma isoform; PI3-kinase subunit gamma; PI3K-gamma; PI3Kgamma; PtdIns-3-kinase subunit gamma; Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase 110 kDa catalytic subunit gamma; PtdIns-3-kinase subunit p110-gamma; p110gamma; Phosphoinositide-3-kinase catalytic gamma polypeptide; Serine/threonine protein kinase PIK3CG; 1 phosphatidylinositol 3 kinase; p120-PI3K; p120 PI3K; 5-bisphosphate 3-kinase 110 kDa catalytic subunit gamma; 5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit gamma isoform; p110 gamma; Phosphatidylinositol 3 kinase catalytic 110 kD gamma; Phosphatidylinositol 3 kinase gamma, p110 gamma; Phosphatidylinositol 3 kinase, catalytic, gamma polypeptide; Phosphatidylinositol 4 5 bisphosphate 3 kinase 110 kDa catalytic subunit gamma; Phosphatidylinositol 4 5 bisphosphate 3 kinase catalytic subunit gamma; Phosphatidylinositol 4 5 bisphosphate 3 kinase catalytic subunit gamma isoform; Phosphatidylinositol-4; Phosphoinositide 3 kinase catalytic gamma polypeptide; Phosphoinositide 3 kinase gamma catalytic subunit; PI3-kinase subunit gamma; PI3CG; PI3K; PIK3; Pik3cg; PtdIns-3-kinase subunit gamma; PtdIns-3-kinase subunit p110-gamma; Serine/threonine protein kinase PIK3CG.
         1mg/1ml
     0.2ml/200μg
    抗体来源  Rabbit
    克隆类型  polyclonal
    交叉反应  Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
    产品类型  一抗
    研究领域  肿瘤 免疫学 信号转导 激酶和磷酸酶 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
    蛋白分子量  predicted molecular weight: 121kDa
         Lyophilized or Liquid
     KLH conjugated synthetic peptide derived from human PIK3 gamma
         IgG
    纯化方法  affinity purified by Protein A
     Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
    产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500
    (石蜡切片需做抗原修复)
    not yet tested in other applications.
    optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
    保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
    Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

     

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