siRNA合成 慢病毒腺病毒实验专家-追求品质-请选汉恒

化学合成siRNA

在较早的哺乳动物 RNAi 实验中， siRNAs 是通过化学方法合成的，就像合成引物一样， 是应用起来最方便的一种方法，研究人员几乎不需要做什么工作。但是RNA合成成本高，定制周期长，特别是有特殊需求的RNA序列。由于价格比其他方法高出很多， 而且设计好的 siRNAs 中通常只有大约 25% 的 siRNAs 能高效抑制基因的表达（抑制效率 >80% ）， 一个基因通常合成 3—5 对 siRNAs ， 这使得化学合成 siRNA 的成本更高 （就是 6 — 10 条

siRNA的化学合成

化学合成的siRNA 与生物合成siRNA 相比，有以下优点：►操作简便，研究人员得到合成好的siRNA 后，进行简单的稀释处理即可实验。►转染效率高，相对于分子量较大的DNA 质粒，其转染效率高。►对细胞的或者组织的毒副作用小。►可大规模制备，本公司的合成规模可达到克级 (一次合成量1 - 100 g)。►特别适用于基因靶位点已确定，需要大量siRNA 进行siRNA 动物实验研究。

SiRNA 实验十大秘诀

mRNA 区域设计 siRNA。 2.选择 GC 含量低的 siRNA 研究人员发现 G/ C 含量 40–55％ 的 siRNA 活性比 G/ C 含量高于 55％ 的高。 3.纯化体外转录的 siRNA 确保所有用于转染的 siRNA 大小和纯度。为了实现最高级别的纯度，我们建议使用玻璃纤维过滤器结合和洗脱，或用凝胶纯化。所用的凝胶为 15- 20％ 的丙烯酰胺凝胶，以除去反应体系中多余的核苷酸、短低聚物、蛋白质和盐。注意：化学合成的 RNA 通常需要通过凝胶电泳进行纯化。 4.谨防RNA