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RNAi(RNA干扰)技术服务
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汉恒生物
RNAi(RNA干扰)技术服务
一、RNA干扰技术概述
RNA干扰(RNA interfering,RNAi)现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。由于RNAi具有高度的序列专一性,可以特异地将特定的基因沉默,从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种强有力的工具。RNAi技术可以广泛应用到包括功能学,药物靶点筛选,细胞新号传导通路分析,疾病治疗等。
成功的RNAi实验设计是您实验成功的前提。汉恒生物专业的设计人员凭借多年的设计经验为您提供完整的RNAi实验设计服务和优化的siRNA,shRNA以及RNAi检测的探针和引物的设计服务。完善的实验设计,精准的靶标以及引物设计使您的实验节省人力和物力。
二、技术流程
1、基因的mRNA序列设计3条干扰片段(客户不提供干扰序列,可由汉恒设计);
2、把干扰片段设计成茎环结构克隆到含U6启动子或其他特定启动子的载体中,测序验证无误;
3、把空载和干扰质粒共转染细胞;
4、用western blot检测干扰效率,筛选到干扰效率最高的片段可用于后续的研究。
三、客户需提供
1、客户提供干扰序列:需要提供RNA干扰的目的基因的名称(或Gene Bank号)、序列,并与我们共同讨论实验方案;
2、客户不提供干扰序列:由汉恒代为设计三条siRNA干扰序列。
四、报告内容及标准
1、siRNA/shRNA序列;
2、构建的载体以及测序报告;
3、荧光定量PCR检测报告/Western blot检测报告等;
4、具体实验方法、步骤、所用试剂、仪器及相关分析数据等。
五、收费标准及服务周期
收费标准及服务周期需根据客户提供的样品和具体要求不同而有所改变,详细请跟客服人员联系或参考所签订的合作合同。
六、质量保证
1、客户提供的干扰序列我们只负责构建及测序正确;
2、由汉恒代为设计的三条干扰序列,保证其中一条干扰效率不低于70%。
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文献和实验RNA干扰(RNA interference,RNAi)综述
RNA抑制基因的表达的效率比纯化后的反义RNA至少高几个数量 ,他们称此现象为ds RNA介导的RNA干扰(RNAi)。图示 Effects of mex-3 RNA interference on levels of the endogenous mRNA. Nomarski DIC micrographs show in situ hybridization of 4-cell stage embryos.
RNA干扰技术[RNA interference,RNAi]
顿卡耐基研究院的Andrew Fire和马萨诸塞大学医学院的Craig Mello才首次揭开这个悬疑之谜。通过 大量艰苦的工作,他们证实,Su Guo博士遇到的正义RNA抑制基因表达的现象,以及过去的反义RNA技术对基因表达的阻断,都是由于体外转录所得RNA中污染了微量双链RNA而引起。当他们将体外转录得到的单链RNA纯化后注射线虫时发现,基因抑制效应变得十分微弱,而经过纯化的双链RNA却正好相反,能够高效特异性阻断相应基因的表达。该小组将这一现象称为RNA干扰(RNA interference
【原创】采用GenEscort™ 转染试剂实施RNA干扰(RNAi)实验进行肿瘤的基因治疗研究
以FAK为靶点的RNA干扰的黑色素瘤基因治疗 RNA 干扰(RNA interference, RNAi)是由双链RNA 介导的序列特异性的转录后基因沉默现象。它通过识别与之序列相同的mRNA 来使特定基因在转录后水平被降解。RNAi 技术具有高的基因沉默效率和特异性, 为基因治疗等研究领域提供了一个新的研究手段。黏着斑激酶(FAK)是一种定位于黏着斑的非受体型酪氨酸激酶,参与调控细胞的运动和增殖等生命功能。FAK 在肿瘤的生成和恶化过程中起重要作用,在多种肿瘤细胞系中均观察到了FAK
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